【摘 要】
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稻黄单胞菌引起的水稻白叶枯病是一种重要的细菌性病害,能使水稻严重减产,是我国水稻生产上的重要细菌病害之一。传统防治措施主要以抗生素为主,随着抗生素的大量使用,病原细菌抗药性的问题日益严峻。以病原细菌的毒力因子为靶点,在不影响细菌生长的前提下,阻断病原菌对宿主植物的侵染达到防治病害的目的,成为新型抗菌药物筛选及研发的新思路和新途径。T3SS(Type Ⅲ Secretion System)是病原细菌在侵染宿主植物时的关键毒力因子,存在于众多革兰氏阴性病原细菌中。由于具有高度的保守性,而且不是细菌生长的关键因
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稻黄单胞菌引起的水稻白叶枯病是一种重要的细菌性病害,能使水稻严重减产,是我国水稻生产上的重要细菌病害之一。传统防治措施主要以抗生素为主,随着抗生素的大量使用,病原细菌抗药性的问题日益严峻。以病原细菌的毒力因子为靶点,在不影响细菌生长的前提下,阻断病原菌对宿主植物的侵染达到防治病害的目的,成为新型抗菌药物筛选及研发的新思路和新途径。T3SS(Type Ⅲ Secretion System)是病原细菌在侵染宿主植物时的关键毒力因子,存在于众多革兰氏阴性病原细菌中。由于具有高度的保守性,而且不是细菌生长的关键因素,因此可以作为新型小分子抑制剂筛选及开发的理想靶标。
本研究将T3SS作为靶标,完成了345个化合物的筛选,主要包括植物次生代谢产物、人工合成化合物以及海洋微生物提取物。发现了对T3SS有抑制作用的化合物,进一步的生长曲线测试筛选出对病原菌生长没有影响的化合物CZ-1、CZ-4和CZ-9, Ⅲ-2、Ⅲ-3、Ⅲ-4、Ⅲ-12和Ⅲ-14,WS-C-1、WS-C-17、WS-C-22和WS-C-24。非寄主烟草过敏性反应显示CZ-1、CZ-4和CZ-9,Ⅲ-2、Ⅲ-3和Ⅲ-4均能完全抑制HR, Ⅲ-12和Ⅲ-14则没有明显的影响,结果说明,CZ-1、CZ-4和CZ-9,Ⅲ-2、Ⅲ-3和Ⅲ-4是通过影响 T3SS 功能,而非细菌生长,影响了 Xoo 烟草诱导 HR 的能力。通过qRT-PCR和转录组测序对其相关作用机制进行了初步的研究,在添加抑制剂的情况下,相关基因均受到良好的抑制,并测试了相关化合物对Xoo在水稻幼苗及成株上致病性的影响。最终筛选得到10个具有良好活性的化合物,它们可能通过HrpG/HrpX调控途径影响了T3SS发挥作用,从而影响了Xoo在水稻上的致病性。这一结果为发展新型T3SS抑制剂及其在细菌病害防控方面提供了理论依据。
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