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大量的分子生物学研究表明，癌症发生发展的关键是细胞内基因的改变。克隆肿瘤相关基因，深入研究其结构与功能，不仅可以阐明癌变原理，而且对癌症的基因诊断、基因治疗和预防都有重要意义。肺癌是一种常见的恶性肿瘤，其高发病率和低生存率促使人们对它进行了多方面的研究。现已发现，肺癌的发生与发展同多种癌基因与抗癌基因的改变密切相关。在此基础上发展起来的基因治疗已为肺癌的防治带来了新的希望。 为了寻找新的肺癌相关基因，深化对肺癌发病机理的认识，同时也为了探索新的肺癌基因治疗的靶基因，我们构建了人肺鳞癌细胞cDNA表达文库，用自制的特异性抗人肺癌单抗从中筛出了6个阳性克隆。选择其中最大的一个克隆进行了测序分析，发现这是一个新的cDNA序列。对该序列重组质粒转染的NIH3T3细胞中，cDNA克隆的表达及其对转染细胞生长特性的影响进行了初步研究。 1．人肺鳞癌细胞cDNA表达文库的构建：以肺鳞癌L-78细胞的总RNA为模板，用Not I-Oligo(dT)为引物，逆转录合成cDNA第一链，然后置换合成第二链。与克隆接头EcoR I衔接子连接后，经Not I酶切，定向重组于噬菌体λgt11 sfi-Not表达载体。最后建成的cDNA文库含1.43×10~6个克隆，重组子数＞97％。 2．cDNA文库的免疫学筛选：用特异性抗人肺癌单抗ALT-04为探针，3×10~4pfu／90mm平皿的密度，对整个文库进行了初筛，筛选数达