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负责剪切新生多肽或蛋白N末端甲硫氨酸的甲硫氨酰氨肽酶(methionineaminopeptidase,MetAP)是一类二价金属离子依赖的蛋白酶,对维持细胞正常生理功能具有重要作用。甲硫氨酰氨肽酶是潜在的抗细菌、抗真菌和肿瘤治疗分子靶点。光亲和标记技术是分子生物学,细胞生物学,有机化学等学科有机结合发展的新技术。光亲和标记利用光活性小分子化合物作为工具探针,经特定波长的光照射分解产生高活性中间体,与其受体活性部位形成不可逆的共价结合,其结果是在一个配体和它的特异性受体之间引入一个共价键,从而直接标记靶蛋白。光亲和标记技术在药物的发现与发展中主要有两个方面的应用:靶标蛋白与小分子配体作用模式的确定(微观)及新靶点的确定(宏观)。运用光亲和标记技术,大量的与疾病相关的靶点被发现、多种小分子与生物大分子作用的模式被确定,这些信息对合理药物设计具有非常重要的意义。本论文在筛选得到酵母I型甲硫氨酰氨肽酶抑制剂的基础上,考察这些活性化合物对酵母菌的生长抑制。并采用光亲和标记技术对小分子化合物和大肠杆菌甲硫氨酰氨肽酶(Escherichia coli methionine aminopeptidase,EcMetAP 1) 的结合方式和作用机制做了初步的探讨。本论文第一部分的工作是对酵母I型甲硫氨酰氨肽酶(ScMetAP1) 的抑制剂进行生物活性测定,即抑菌实验。通过抑菌实验表明这类化合物对MetAp2缺失(△map2) 酵母比野生型(WT)酵母生长的抑制活性好,但是对MetAP1缺失(△map1) 酵母生长没有影响,说明这类化合物确实是选择性作用在ScMetAP1上,可作为潜在的抗真菌先导化合物。这类化合物对酵母生长的抑制活性与其在分子水平对Co(II)-ScMetAP1的抑制作用无明显相关性,这可能是因为体内ScMetAP1的金属离子不是CO2+,而是其他的二价金属离子。为了进一步探索这个问题,研究不同离子激活的ScMetAP1对化合物抑制选择性的变化,为ScMetAP1抑制剂的进一步改造和开发提供思路。这些实验结果表明金属离子替代的ScMetAP1改变了对抑制剂的选择性,同时表明,确定ScMetAP1内源性的金属离子对开发有疗效的ScMetAP1抑制剂具有重要意义。