【摘 要】
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目的:研究竹黄颗粒通过miR-330/CNTTB1/CyclinD1通路调控角质形成细胞。方法:1.用qPCR检测银屑病患者与健康人皮肤中CTNNB1的mRNA表达差异;2.测定在IL-22有无下HaCaT细胞和HK
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目的:研究竹黄颗粒通过miR-330/CNTTB1/CyclinD1通路调控角质形成细胞。方法:1.用qPCR检测银屑病患者与健康人皮肤中CTNNB1的mRNA表达差异;2.测定在IL-22有无下HaCaT细胞和HKC中CTNNB1的mRNA与蛋白质水平;3.使用蛋白质印迹测定确定响应于共处理IL-22和miR-330抑制的CTNNB1蛋白水平;4.通过搜索miRBase,构建了在预测的miR-330结合位点含有5bp突变的野生型和突变CTNNB1(mut-CTNNB1)荧光素酶报告基因载体;5.使用双荧光素酶测定法测定miR-330与CTNNB1是否能靶向结合;6.用LV-miR-330感染HaCaT细胞和HKCs,使用蛋白质印迹测定法测定HaCaT细胞和HKC中的细胞周期蛋白D1和Axin2的蛋白质水平;7.检测竹黄颗粒介导下miR-330/CNTTB1/CyclinD1通路中的蛋白及细胞水平。结论:1.银屑病患者皮损中CTNNB1的mRNA表达呈下降趋势;2.IL-22增加角质形成细胞中CTNNB1的mRNA与蛋白质的表达;miR-330可以抑制IL-22诱导增加的CTNNB1蛋白;3.miR-330可以直接靶向调节CTNNB1的表达;4.miR-330/CTNNB1/CyclinD1通路可以调节角质形成细胞;5.竹黄颗粒可通过miR-330/CTNNB1/CyclinD1通路调节角质形成细胞。
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