【摘 要】
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本研究将荧光微球纳米材料作为信号标记物,基于抗原抗体的特异性识别作用,建立了四种高灵敏的荧光免疫层析检测方法,实现了对水产品中四种硝基呋喃类兽药代谢物残留量的快速定量检测。呋喃妥因代谢物荧光微球免疫层析试纸条的最佳工作条件为:硝酸纤维素膜为Millipore HF135s;样品缓冲液为p H 7.4的PBS;荧光微球标记抗体时抗体添加量为90μg;羊抗鼠二抗（Ig G）稀释倍数为50倍;包被原稀释
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本研究将荧光微球纳米材料作为信号标记物,基于抗原抗体的特异性识别作用,建立了四种高灵敏的荧光免疫层析检测方法,实现了对水产品中四种硝基呋喃类兽药代谢物残留量的快速定量检测。呋喃妥因代谢物荧光微球免疫层析试纸条的最佳工作条件为:硝酸纤维素膜为Millipore HF135s;样品缓冲液为p H 7.4的PBS;荧光微球标记抗体时抗体添加量为90μg;羊抗鼠二抗（Ig G）稀释倍数为50倍;包被原稀释倍数为70倍;荧光微球抗体复合物（FMs-Ab）添加量为5μL;Ig G和包被原喷涂量为0.5μL·cm-1。本方法检测限为0.004μg·L-1,检测时间为10 min,检测线性范围为0.005～5μg·L-1。样品添加回收率在75.88%～104.38%之间,变异系数在1.95%～10.61%之间。呋喃它酮代谢物荧光微球免疫层析试纸条的最佳工作条件为:硝酸纤维素膜为Millipore HF135s;样品缓冲液为p H 7.4的PBS;荧光微球标记抗体时抗体添加量为70μg;Ig G稀释倍数为30倍;包被原稀释倍数为50倍;FMs-Ab添加量为3μL;Ig G和包被原喷涂量为0.5μL·cm-1。本方法检测限为0.01μg·L-1,检测时间为10 min,检测线性范围为0.01～10μg·L-1。样品添加回收率在78.82%～102.89%之间,变异系数在2.23%～8.40%之间。呋喃唑酮代谢物荧光微球免疫层析试纸条的最佳工作条件为:硝酸纤维素膜为Millipore HF135s;样品缓冲液为p H 7.4的PBS;荧光微球标记抗体时抗体添加量为60μg;Ig G稀释倍数为70倍;包被原稀释倍数为20倍;FMs-Ab添加量为5μL;Ig G和包被原喷涂量为0.5μL·cm-1。本方法检测限为0.008μg·L-1,检测时间为10 min,检测线性范围为0.01～10μg·L-1。样品添加回收率在77.67%～106.43%之间,变异系数在1.90%～9.41%之间。呋喃西林代谢物荧光微球免疫层析试纸条的最佳工作条件为:硝酸纤维素膜为Millipore HF135s;样品缓冲液为p H 7.4的PBS;荧光微球标记抗体时抗体添加量为60μg;Ig G稀释倍数为50倍;包被原稀释倍数为100倍;FMs-Ab添加量为3μL;Ig G和包被原喷涂量为0.5μL·cm-1。本方法检测限为0.009μg·L-1,检测时间为10 min,检测线性范围为0.01～10μg·L-1。样品添加回收率在77.90%～105.85%之间,变异系数在2.23%～8.33%之间。四种试纸条检测方法特异性良好,同时商业化检测试剂盒验证了本研究建立的四种检测方法的准确性,这些方法适用于水产品中的硝基呋喃类兽药代谢物的快速定量检测。
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