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目的检测KIF3A mRNA和蛋白质在三阴性乳腺癌中的表达并分析其与三阴性乳腺癌患者临床病理特征的关系;检测KIF3A对三阴性乳腺癌细胞增殖和迁移侵袭能力的影响,初步探讨KIF3A在三阴性乳腺癌发生、发展中的作用和可能的分子机制。方法采用实时荧光定量PCR和Western blot技术检测9对新鲜三阴性乳腺癌组织及其癌旁相对正常组织中KIF3A的表达;应用免疫组织化学技术检测KIF3A在98对三阴性乳腺癌组织及其癌旁相对正常组织中的表达情况;分析三阴性乳腺癌组织中KIF3A的表达水平与临床病理特征的关系;通过慢病毒介导的RNA干扰技术对高表达KIF3A的人三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231和BT549进行KIF3A基因沉默,构建KIF3A过表达质粒并转染KIF3A低表达的人三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-468使其细胞内KIF3A基因过表达;通过MTT及平板克隆形成实验检测KIF3A对三阴性乳腺癌细胞增殖能力的影响;通过流式细胞术检测KIF3A对三阴性乳腺癌细胞周期的影响;通过划痕实验及transwell迁移侵袭实验检测KIF3A对三阴性乳腺癌细胞迁移及侵袭能力的影响;应用Western blot技术检测KIF3A对三阴性乳腺癌Rb-E2F信号通路和上皮-间质转化相关蛋白的影响。结果实时荧光定量PCR和Western blot结果显示新鲜三阴性乳腺癌组织中KIF3A mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.01);免疫组织化学技术结果显示,在98例三阴性乳腺癌患者中,KIF3A在70例(71.4%)癌组织中的表达高于癌旁相对正常组织,差异具有统计学意义(P<0.01)。我们还发现,在32例有淋巴结转移的三阴性乳腺癌患者中,KIF3A在25例(78.1%)淋巴结转移灶中的表达高于原发灶,差异具有统计学意义(P<0.01)。KIF3A在三阴性乳腺癌组织中的表达水平与患者的淋巴结转移、肿瘤复发有关(P均<0.05),而与年龄、肿瘤大小和肿瘤分级无关(P>0.05);MTT实验和平板克隆形成实验结果显示沉默KIF3A后,三阴性乳腺癌细胞的增殖能力明显减弱(P<0.01),而过表达KIF3A后,三阴性乳腺癌细胞的增殖能力明显增强(P<0.05);细胞周期检测显示,沉默KIF3A后,G1期细胞比例增加而S期细胞比例降低(P<0.01),而过表达KIF3A后,G1期细胞比例降低而S期细胞比例增加(P<0.05);划痕实验及transwell迁移侵袭实验结果显示沉默KIF3A后,三阴性乳腺癌细胞的迁移侵袭能力明显减弱(P<0.01),而过表达KIF3A后,三阴性乳腺癌细胞的迁移侵袭能力明显增强(P<0.01);沉默KIF3A可抑制三阴性乳腺癌细胞Rb-E2F信号通路相关蛋白phospho-Rb、E2F1、Cyclin E1、Cyclin D1的表达而促进P21的表达(P<0.05),过表达KIF3A可促进三阴性乳腺癌细胞phospho-Rb、E2F1、Cyclin E1、Cyclin D1的表达而抑制P21的表达(P<0.05);沉默KIF3A可抑制三阴性乳腺癌细胞上皮-间质转化相关蛋白ZEB1、Vimentin、MMP9、MMP2的表达而促进E-cadherin的表达(P<0.05),过表达KIF3A可促进三阴性乳腺癌细胞ZEB1、Vimentin、MMP9、MMP2的表达而抑制E-cadherin的表达(P<0.05)。结论KIF3A可能促进三阴性乳腺癌的发生和发展;在体外沉默KIF3A的表达可以通过抑制Rb-E2F信号通路抑制三阴性乳腺癌细胞周期中的G1/S转换,进而抑制细胞周期进程并最终抑制细胞增殖;在体外沉默KIF3A的表达可以通过抑制上皮-间质转化抑制三阴性乳腺癌细胞的迁移和侵袭;KIF3A可能成为治疗人三阴性乳腺癌的新靶点。