内毒素耐受对脓毒症大鼠肠道功能保护作用的实验研究

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目的:动态观察内毒素耐受大鼠在内毒素血症时肠道炎症反应和免疫功能的变化,探讨内毒素耐受对内毒素血症大鼠肠道的保护作用及其机制。方法:选择健康成年雄性SD大鼠90只,随机分成3组:正常对照组(30只),内毒素(LPS)组(30只)和内毒素耐受组(30只)。内毒素耐受组大鼠于实验第1日经腹腔注射小剂量内毒素(LPS)0.1mg/kg;第二到五天继续每天腹腔注射小剂量内毒素0.5mg/kg,建立内毒素耐受模型,LPS组和正常对照组大鼠在上述时间均给予等量生理盐水;最后一次注射LPS 72小时后,毒素耐受组和LPS组大鼠均腹腔注射大剂量LPS 10mg/kg,正常对照组大鼠注射等量生理盐水,于注射大剂量LPS前(oh)和注射后2h、4h、6h、12h取大鼠肠组织制备肠黏膜上清液,用双抗体夹心法测定肠黏膜组织中分泌型免疫球蛋白A(sIgA)的含量,用免疫组化技术检测肠组织细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达,并与对照组进行比较;光学显微镜下观察3组大鼠肠组织病理学变化,并进行病理学评分。结果:内毒素耐受组在给予小剂量LPS后没有出现体重下降。内毒素耐受组肠黏膜中sIgA的含量较正常对照组明显升高,6h最为明显(p<0.05),LPS组sIgA含量2h明显升高(p<0.05),从6h开始下降(p<0.05)。内毒素耐受组给予大剂量LPS后肠黏膜ICAM-1的表达没有呈上升趋势,以6hICAM-1的表达反而最低,而LPS组肠黏膜ICAM-1的表达随时间的延长逐渐升高,明显高于内毒素耐受组。肠组织病理HE染色片可见:LPS组肠黏膜水肿,绒毛脱落,并伴有大量炎性细胞浸润;而内毒素耐受组上述表现较LPS组减轻。两组肠黏膜炎症损伤病理学评分有显著差异(p<0.05)。结论:内毒素耐受可减轻内毒素血症导致的肠道黏膜屏障的损害,通过增加sIgA的分泌,改善肠粘膜屏障的功能,通过下调ICAM-1的表达,减轻炎症介质对肠道屏障功能的损伤。
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