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目的:探讨双氢杨梅树皮素(DHM)在2.2.15细胞培养中抗乙肝病毒(HBV),及对急性、免疫性、慢性肝损伤的保护作用。
方法:(1)通过MTT法测定DHM药液对2.2.15细胞的毒性,观察其在无毒浓度下对2.2.15细胞分泌HBsAg、HBeAg的抑制作用;(2)通过MTT法测定DHM含药血清对2.2.15细胞的毒性,观察其在最适宜浓度下对2.2.15细胞分泌HBsAg、HBeAg的抑制作用;(3)用CCl4诱导小鼠急性肝损伤模型,观察其对小鼠血清ALT、AST活性的影响,并观察肝组织病理变化;(4)用D-GalN诱导小鼠急性肝损伤模型,观察其对小鼠血清ALT、AST活性的影响,并观察肝组织病理变化;(5)用BCG+LPS诱导小鼠免疫性肝损模型,观察其对血清ALT、AST和肝组织中SOD活性、肝组织MDA含量的影响及肝组织病理变化;(6)用CCl4诱导慢性肝损伤模型,观察其对小鼠血清ALT、AST活性、TP、ALB、HA含量、肝组织HyP含量的影响及肝组织病理变化。
结果:(1)DHM对2.2.15细胞的TC50为272.5μg/ml、TC0为62.5μg/ml,无毒浓度下(62.5-3.9μg/ml)对2.2.15细胞分泌HBsAg、HBeAg的抑制作用与浓度呈正相关;(2)DHM含药血清在2.2.15细胞中最适宜的添加浓度为20%,高(300mg/kg/次)、低(150mg/kg/次)剂量组DHM含药血清在最适宜浓度下(20-5%)对2.2.15细胞分泌HBsAg、HBeAg的抑制作用与DHM含药血清浓度呈正相关;(3)DHM对CCl4所致小鼠急性肝损伤可降低血清中ALT、AST活性,明显减轻肝组织病理变化程度;(4)DHM对D-GalN所致小鼠急性肝损伤可降低血清中ALT、AST活性,明显减轻肝组织病理变化程度;(5)DHM对BCG+LPS所致小鼠免疫性肝损伤可降低血清中ALT、AST活性,升高肝组织中SOD活性、降低MDA含量及明显减轻肝组织病理变化程度;(6)对CCl4所致小鼠慢性肝损伤可降低血清中ALT、AST活性、HA含量、肝组织中HyP含量,升高血清中TP、ALB含量,减轻肝组织病理变化程度。
结论:DHM有抑制2.2.15细胞分泌HBsAg、HBeAg的作用,其抑制作用与剂量成正相关,提示其有抗HBV的作用;对CCl4、D-Gal、BCG+LPS所致小鼠急性、免疫性、慢性肝损伤有保护肝功能,减轻肝组织病理变化,推测可能是由于其在肝脏中具有抗氧化和抗纤维化的作用。