木薯几个与淀粉合成和代谢相关基因的物理定位研究

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木薯(Manihot esculenta Crantz)是重要的能源植物和粮食作物。木薯块根富含淀粉,是工业酒精的重要来源之一。淀粉分支酶(SBE)和颗粒结合型淀粉合成酶(GBSS)是木薯淀粉合成过程的关键酶。中性/碱性转化酶(MeNINVl、nINVl)和己糖激酶(MeHXK2)是淀粉代谢过程的关键酶。前人已克隆了表达这些酶的基因,但有关它们在染色体上的物理定位的研究还未有报道。本研究以华南6号木薯(2n=36)根尖为材料进行细胞染色体标本的制备,采用荧光原位杂交技术(fluorescenceinsitu hybridization,FISH)对 GBSS、SBEI、MeNINVf、nINVl、和MeHXK2基因进行了染色体的物理定位。揭示了这些基因在染色体上的位置、分布特点及与其他基因的关系。具体结果如下:(1)对木薯FISH的试验体系中材料预处理、染色体标本的预处理及杂交后标本的洗脱等关键步骤进行了优化。(2)通过单色FISH对GBSSI、MeNINVl、nINV/和MeHXK2基因进行了物理定位,将GBSSI基因定位于13号染色体的短臂上,信号位点到着丝粒的百分距离约26.3±0.1;MeNIArVl基因定位于11号染色体的短臂上,信号位点到着丝粒的百分距离约40.1 ±0.3;MeHXK2基因位于12号染色体的短臂,其信号位点距着丝粒的百分距离为21.0土0.2;nINVl需要进一步研究才能准确定位。(3)通过双色FISH将GBSSII基因定位于11号染色体的短臂,信号位点距着丝粒的百分距离为14.0±0.5;SEI基因定位于12号染色体的长臂,其信号位点距着丝粒的百分距离为 76.2 ±0.2。(4)对本研究定位的5个基因进行连锁分析:结果显示GBSSII基因与MeNINVl基因分别位于11号染色体的短臂上,两者属于连锁基因;SBEI基因和MeHXK2基因分别位于12号染色体长臂和短上,互为连锁基因。
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