第一部分PM2.5对支气管上皮细胞白介素-8和SIRT1表达的影响目的:观察不同浓度PM2.5悬液对支气管上皮细胞(BEAS-2B)白介素(IL)-8和沉默信息调节因子2相关酶1(Sirtuin 1,SIRT1)表达的影响。方法:将BEAS-2B细胞系传代接种于培养板培养,待细胞生长至80%融合后吸弃培养基,以无血清培养基饥饿培养6小时后,分为四组:对照组、PM2.5 25组、PM2.5 50组、PM2.5 100组。对照组:细胞培养液中加入PM2.5 0μg/mL;其余三组细胞培养液中分别加入PM2.5水溶液(PM2.5终浓度分别为25μg/mL、50μg/mL、100 μg/mL)刺激24小时;收集上清液及BEAS-2B细胞,酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测上清液中IL-8蛋白水平,BEAS-2B细胞提取蛋白质,用western blot方法检测细胞中SIRT1蛋白的表达水平。结果:与对照组相比,其余三组细胞培养上清液中IL-8水平显著增加,且随着PM2.5浓度的升高而呈浓度依赖性升高(p值均<0.05);SIRT1蛋白表达水平显著下降,且随着PM2.5浓度的升高而呈浓度依赖性下降(p值均<0.05)。结论:PM2.5可诱导BEAS-2B细胞分泌表达IL-8蛋白,抑制细胞中SIRT1蛋白表达,并呈浓度依赖性。第二部分丹皮酚对PM2.5诱导的支气管上皮细胞IL-8和SIRT1表达的影响目的:观察不同浓度丹皮酚对PM2.5诱导的支气管上皮细胞IL-8和SIRT1表达的影响。方法:将BEAS-2B细胞系传代接种于培养板培养,待细胞生长至80%融合后吸弃培养基,以无血清培养基饥饿培养6小时后,分为6组:对照组、丹皮酚15、丹皮酚30、PM2.5 100组、丹皮酚 15+PM2.5 100组、丹皮酚30+PM2.5 100组。对照组:细胞培养液中加入PM2.5 0μg/mL;丹皮酚15:细胞培养液中加入丹皮酚(终浓度为15μmol/L);丹皮酚30:细胞培养液中加入丹皮酚(终浓度为30μmol/L)PM2.5100组:细胞培养液中加入PM2.5 100μg/mL水溶液;丹皮酚15+PM2.5 100组:细胞培养液中加入15μmol/L丹皮酚预处理1小时后,加入PM2.5水溶液(终浓度为100 μg/mL);丹皮酚30+PM2.5 100组:细胞培养液中加入15μmol/L丹皮酚预处理1小时,后加入PM2.5水溶液(终浓度为100μg/mL),24小时后收集上清液及BEAS-2B细胞,ELISA法检测上清液中IL-8蛋白水平,western blot方法检测BEAS-2B细胞中SIRT1蛋白的表达水平。结果:与对照组相比,丹皮酚15及丹皮酚30两组BEAS-2B细胞上清液中IL-8及细胞中SIRT1表达水平无显著差异性(P值>0.05)。与PM2.5 100组相比,丹皮酚15+PM2.5 100组和丹皮酚30+PM2.5 100组两组细胞上清液中IL-8水平明显下降(P值均<0.05),细胞中SIRT1蛋白水平明显增加(P值均<0.05);其中丹皮酚30+PM2.5 100组细胞上清液中IL-8水平与皮酚15+PM2.5 100组相比明显降低(P值<0.05),而丹皮酚30+PM2.5 100组细胞中SIRT1蛋白水平与丹皮酚15+PM2.5100组显著相比增加(P值<0.05)。结论:丹皮酚可抑制PM2.5诱导的BEAS-2B细胞IL-8蛋白表达,并上调细胞中SIRT1蛋白表达。