金黄色葡萄球菌耐药机制与分子流行病学研究

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目的:阐明扬州及其周边地区不同来源金黄色葡萄球菌的分布状况、耐药特点及机制,了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的SCCmec基因分型及各基因型的耐药特征;采用多位点序列分型(MLST)技术,探讨金黄色葡萄球菌的遗传特性,为防治金黄色葡萄球菌(尤其是MRSA菌株)感染提供依据。方法:以纸片扩散法检测金黄色葡萄球菌对不同种类抗生素的敏感性;采用PCR方法检测各分离菌株携带的耐药基因和鉴定MRSA菌株;以多重PCR方法进行分离菌株的SCCmec基因分型;通过测定7个管家基因(arcc、aroe、glpf、gmk、pta、tpi、yqil)的序列进行分离菌株的MLST分型。结果:(1)从261株金黄色葡萄球菌中检测到48个MRSA株,其中人源36株,检出率为29.75%(36/121);猪源8株,检出率为25.81%(8/31);牛源4株,检出率为15.38%(4/26)。(2)48个MRSA菌株均具有多重耐药,对青霉素G、头孢西丁的而药率达到了100%,对复方新诺明和四环素的耐药率分别为85.42%和81.25%。未发现耐万古霉素的MRSA菌株。213个甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)菌株对青霉素G的耐药率达到了71.36%,对红霉素和四环素的耐药率分别为44.60%和27.70%。MRSA菌株对各类抗生素的耐药率均显著高于MSSA菌株(P<0.05)。(3)48个MRSA菌株中SCCmecⅢ型占58.33%(28/48),SCCmec Ⅴ型占22.92%(11/48), SCCmecⅣ型占8.33%(4/48),CCmec Ⅰ型占2.08%(1/48),未分型的MRSA菌株占8.33%(4/48),未发现SCCmec Ⅱ型菌株。人源MRSA菌株以SCCmecⅢ型为主,占77.78%(28/36),牛源MRSA菌株全部为SCCmec Ⅴ型,猪源MRSA菌株中未知型占50%。(4)对195株金黄色葡萄球菌进行MLST测序分型,共检测到42种ST型,新定义10种等位基因型、12种ST型。人源MRSA菌株主要以SCCmecⅢ-ST239为主,猪源MRSA菌株以SCCmec Ⅴ-ST9为主,牛源MRSA菌株以SCCmecⅢ-ST630为主。结论:(1) MRSA菌株在多种宿主体内均能检到,对多种抗生素耐药率均较高,具有多重耐药性,未发现万古霉素耐药菌株。(2) MRSA菌株的耐药率普遍高于MSSA菌株,且SCCmec盒式染色体与MRSA的多重耐药密切相关。(3)不同来源MRSA菌株在基因结构上存在差异,SCCmec基因分型技术及MLST分型技术可有效阐明MRSA菌株的流行病学特征。
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