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天然产物种类繁多,成分多样、结构复杂,且许多成分具有生理活性,对于其组成的分级分离,对于天然产物的深度研究与应用具有重要意义。本论文基于色谱分级原理设计并构建了一种新型天然产物连续分级装置,并将其用于烟草烘丝尾气收集液中有效成分与金银花中绿原酸和总黄酮的分级分离研究。 基于色谱分级原理的天然产物连续分级装置采用不同分离模式色谱柱串联的方法实现不同性质组分的分级分离。将732型阳离子交树脂柱、717型阴离子交换树脂柱、AB-8型大孔吸附树脂柱串联,色谱柱间以三通阀相连,对烟草烘丝尾气收集液进行连续的分级分离。考察了吸附流速、上样量、洗脱剂种类对分级分离的影响,基于GC/MS分析结果对分级效果加以评价,优化分离条件。研究发现天然产物连续分级装置能有效将烟草尾气收集液进行分级分离获得生物碱类、有机酸类、中性致香成分三类主要成分,其中包括乙酰基吡咯、β-二氢大马酮、苯甲酸、烟碱等有经济价值的成分。所构建的装置具有连续分级分离能力,以及良好的稳定性与重复性,消耗的溶剂量少的优点。放大后的装置分级分离效果仍较好,为后期的工业化应用提供了重要的基础数据。 为了进一步对分级产物进行精细分离,采用高效液相色谱对烟草尾气收集液的分级分离产物加以分析,探索相应的选择性分离方法。采用C18反相色谱柱和万古霉素色谱柱分别在反相和亲水的模式下进行分析条件的探索,证实反相色谱模式对于其中的大多数重要化合物具有很好的分离效果,而亲水模式可以对部分化合物进行较好的选择性分离。 将天然产物连续分级分离色谱系统加以改进,并用于金银花水提液中绿原酸和总黄酮的连续分级分离。考察上样浓度、上样液与洗脱液pH、上样与洗脱流速、上样体积、洗脱中乙醇含量、洗脱流速、洗脱剂用量对分级效果的影响,发展了能够有效将金银花水提液中的绿原酸和总黄酮进行分级分离的方法。绿原酸和总黄酮的得率分别为69.0%与64.5%,纯度分别为63.0%与90.3%。