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第一部分:大鼠胚脑皮质神经元细胞的原代培养、鉴定和缺氧模型的建立 目的:进行大鼠胚脑皮质神经元细胞培养和鉴定,并建立大鼠胚脑皮质神经元细胞培养的缺氧模型。 方法:(1)运用胰蛋白酶和DNase Ⅰ联合酶消化法,选择合适孔径的筛网过滤,并以L-多聚赖氨酸作为神经元体外培养的生长基质,进行大鼠胚脑皮质神经元的体外培养;(2)运用免疫荧光组织化学方法检测神经元特异的抗TubulinβⅢ单克隆抗体和神经胶质细胞特异的抗GFAP多克隆抗体分别进行神经元细胞和神经胶质细胞的鉴定,检测体外培养大鼠胚脑皮质神经元细胞的纯度;(3)运用国产厌氧培养箱在37℃含85%N2、5%CO2、10%H2混合气体环境下建立大鼠胚脑皮质神经元细胞的缺氧模型。 结果:(1)通过体外培养获得了纯度达95%以上的大鼠胚脑皮质神经元细胞;(2)运用神经元特异的抗TubulinβⅢ单克隆抗体和神