养殖沼液处理系统中抗生素减量及其抗性基因响应的研究

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近年来,随着抗生素在集约化规模养殖业的大规模使用甚至滥用,抗生素在环境介质中的传播范围加大,可携带抗性基因的抗性菌在数量以及种类方面都在不断扩大。人类正常生命活动已对环境生态平衡造成巨大的潜在危机。因此,作为“三高”废水的畜禽养殖沼液引起了人们的广泛关注。污水处理厂中不同的处理工艺以及该工艺的运行参数都会影响废水中抗生素的去除效果,同时,抗性基因也会表达出不同的响应特征。本研究采用好氧颗粒污泥技术处理典型三高废水—养殖沼液废水,主要针对废水中两类典型抗生素污染物(四环素类和磺胺类)进行研究。另外,本试验采用分子生物学技术进一步研究其抗生素抗性基因的响应特征,得出以下主要结论:(1)好氧颗粒污泥系统在各参数调控运行期间,水质条件分别采用模拟和实际两类养殖沼液废水(均投加抗生素),系统都可保持稳定运行。除调控参数为体积交换率时的25%,其余参数条件下,SVI5值稳定维持在19~22 m L/g。在进行单一参数调控时,单位质量颗粒污泥对氨氮的去除效果各有不同,但无显著差异;系统对总氮的去除效果表现一般,总体表现稳定。(2)好氧颗粒污泥系统在各参数进行调控期间,系统对磺胺类抗生素的去除效果均优于四环素类,表现为磺胺类抗生素的去除率平均为90%以上,四环素类抗生素去除率平均约50%。其中,以吸附作用去除的四环素类抗生素浓度维持在50μg/L时,随着污泥浓度的增加,单位质量颗粒污泥所能吸附的四环素类抗生素受到限制。另外,调节运行参数酸碱度和体积交换率,系统对金霉素的去除效果好于四环素和土霉素。(3)本研究选用体积交换率作为调控对象期间,排水比为25%的颗粒污泥系统出现污泥流失,部分颗粒污泥解体,但此时系统对两类抗生素仍有较好的去除效果,尤其是磺胺类抗生素,并未受系统变化的影响。说明系统中微生物不论是以聚集体的颗粒状或是絮体状存在,都不会影响微生物对磺胺类抗生素的降解能力。(4)各参数调控运行期间,四环素类抗性基因tet A、tet M基因相对丰度维持在10-2~10-1左右,稳定性强。Sul基因因参数调控各异而表现出不同的变化趋势,总体来看,相对丰度表现为sul I>sul II基因。另外,系统中生物量和酸碱度的变化对sul I、sul II基因相对丰度影响较小,表明这两种基因在颗粒污泥内含量一定。对于体积交换率发生变化的系统,因微生物所需营养物质和生存环境的变化检测到sul II基因响应特征显著变化,由此说明外界环境发生变化不仅影响微生物正常生命活动也同时会使得微生物体内所携带的sul II基因含量受到影响。(5)好氧颗粒污泥系统在运行150天期间,两类抗性基因相对丰度与相应抗生素投加量和时间相关性不大,tet和sul基因含量并未随着抗生素持续等量投加而逐渐增多。系统稳定运行期间,四环素类抗性基因含量在生物量和酸碱度调控过程中发生微小变化趋势,但总量基本不变,由此推测好氧颗粒污泥系统中发生了抗性基因的水平转移。
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