背景：姜黄素(curcumin)是从姜科植物姜黄中提取的一种多酚类色素，较为广泛存在于许多植物的根茎中，如姜黄、莪术、郁金、菖蒲等。其分子式为C21H20O6，相对分子质量为368．37，是橙黄色的结晶粉末。临床上主要用于治疗内外伤、关节痛疼(类风湿性关节炎)、肝病(特别是黄疸)等。近年来的研究发现，姜黄素具有抗氧化、抗炎和抗癌等广泛的药用价值，可用于治疗心衰、皮肤病、糖尿病、风湿性关节炎等。1982年在小鼠乳腺癌发现了Wnt基因，由于此基因激活依赖小鼠乳腺癌相关病毒基因的插入，因此，当时被命名为Int1基因，相当于果蝇的无翅（Wingless)基因，之后的研究表明，Int1基因在小鼠正常胚胎发育中起重要作用，可控制胚胎的轴向发育。此后大量研究提示了Int1基因在神经系统胚胎发育中的重要性，因此将Wingless与Int1结合，称为Wnt基因。人Wnt基因定位于12q13.在胚胎发育中，Wnt基因调控的重要信号传导系统即为Wnt通路。Wnt信号转导途径包括胞质蛋白、Wnt蛋白、核内转录因子和跨膜受体等。经典Wnt传导途径是：当β-catenin浓度较低的时候,Wnt信号通路会关闭；反之,Wnt信号通路则会开启。细胞内β-catenin的浓度靠两个因素的功能竞争来调节，其中包括:①降解蛋白类,包括APC、Axin、GSK-3β，可以使其β-catenin浓度处于低水平,从而关闭Wnt通路；②拮抗蛋白类,包括Dsh、CK1α、GSK-3β结合蛋白,能够起到拮抗降解蛋白的作用,可以使其β-catenin的水平升高。由于Wnt信号通路的异常激活和多种肿瘤的发病或转移相关,目前已经有了很多Wnt信号通路的相关研究,并在肿瘤发生和发展的作用机制上取得了一些科研成果,但是在寻找阻断Wnt信号通路和肿瘤靶向治疗的方面上还需要更进一步的探索。目的：通过观察姜黄素对人胰腺癌细胞SW1990增殖、凋亡及Wnt/β-catenin信号传导通路相关基因表达，研究姜黄素对人胰腺癌细胞的影响；并利用表面等离子体共振和分子虚拟对接技术，研究姜黄素与Wnt通路的相互作用机制，以探讨姜黄素的抗肿瘤作用。方法：应用MTT法检测不同浓度姜黄素(20、40、60、80、100μmol/L)对人胰腺癌细胞SW1990增殖的抑制作用，用流式细胞仪分析细胞的凋亡率，用WesternBlot方法检测姜黄素对β-catenin蛋白表达的影响，用半定量PCR法检测靶基因VEGF、cyclinD1和c-myc在不同浓度姜黄素作用下的表达情况变化。应用BIAcore分子相互作用实验观察姜黄素的作用方式，用分子虚拟对接技术发现姜黄素与Wnt蛋白某区域的结合位点。结果：姜黄素通过抑制Wnt信号传导通路，对肿瘤细胞的生物学行为影响的实验研究发现：①在不同浓度姜黄素的作用下，胰腺癌SW1990细胞在48小时后，细胞增值抑制率为正相关性，且浓度越大，增殖抑制率越明显，并呈浓度效应关系（P<0.05）。②流式细胞仪检测到，在姜黄素作用于胰腺癌细胞后的48小时，细胞凋亡的百分比随着药物浓度的增加而增高（P<0.05）。③WesternBlot检测显示：胰腺癌细胞SW1990经姜黄素作用48h后的实验组细胞，胞浆β-catenin蛋白含量低于空白对照组。在SW1990细胞中，除20μmol/L浓度组外，其他浓度组与空白对照组比较均有统计学意义（P<0.05）。药物浓度越大，胞浆β-catenin蛋白含量越少，呈剂量依赖性（r=-0.96，P<0.05）。④PCR检测Wnt通路下游靶基因c-myc、cyclinD1和VEGF的mRNA表达量较阴性对照组有着明显减少（P<0.05），而浓度越大表达量越低。基于我们在对BIAcore分子相互作用实验的研究发现，姜黄素可以促进降解复合物的形成，使得胞内β-catenin蛋白得以磷酸化后被降解。分子虚拟对接的研究表明，姜黄素可以通过与DVL2-PDZ的某一区域结合促进β-catenin降解复合体的形成、降低胞内β-catenin水平从而抑制Wnt信号传导通路。结论：姜黄素可抑制胰腺癌癌细胞SW1990的增殖，诱导其凋亡，其机制可能是姜黄素与Wnt蛋白中的DVL2-PDZ区域结合形成降解复合体，来降解细胞质中游离的β-catenin蛋白，从而阻断β-catenin蛋白磷酸化的形成即抑制Wnt/β-catenin信号传导通路的活化。