抑瘤素M在膝关节骨关节炎中的表达

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目的:骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种常见的多因素疾病,其发病趋势随着年龄的增加而递增。骨关节炎的病因复杂,发病机制尚不明确。近年来的研究主要着眼于在全身或局部因素的作用下,关节内各种细胞因子表达失衡,导致关节软骨的退行性变和继发性骨质增生。在已知的细胞因子中,主要由白细胞介素-1(IL-1)和白细胞介素-6(IL-6)是炎症发病的重要调节剂,介导OA的发病过程。抑瘤素M (oncostatin M, OSM)是IL-6蛋白家族中的一员,在骨重建中可调节成骨细胞及破骨细胞活性。目前国内对OSM在肿瘤与类风湿疾病中的作用研究已有报道,但是OSM在OA中的作用及机制研究尚有争议。本研究通过检测OSM在OA滑膜组织中的表达差异,探讨其在骨关节炎发病中的作用。材料和方法:1、选取51例行全膝关节置换术或关节镜手术中获取的关节滑膜组织。依据骨关节炎诊断标准,参照X线片Altman和Ahiback Ⅹ线分级法分为三组:A组:严重0A组,33例(33膝),男8例(8膝),女25例(25膝),47-75岁,平均58.9岁,膝关节病变X线分级3级以上;B组:轻微0A组,10例(10膝),男1例(1膝),女9例(9膝),42-58岁,平均49.3岁,病程3年以下,膝关节病变X线分级1-2级;C组:对照组,8例盘状半月板患者为正常对照组,8例(8膝),男4例(4膝),女4例(4膝),16-24岁,平均18.9岁。2、收集的每例标本分为两份,其中一份放入-80℃冰箱保存备用,另一份立即用4%多聚甲醛固定。取-80℃保存的滑膜组织标本约5mm×5mm×5mm大小,用Trizol一步法提取组织中的总RNA,然后逆转录获得cDNA,以GAPDH为内参,采用实时定量PCR技术(q RT-PCR)扩增目的基因和内参基因。经4%多聚甲醛固定的滑膜标本48小时后常规脱水、透明、包蜡,然后切片机切成5μm厚的组织切片。两步法免疫组化检测各组滑膜组织中0SM的表达情况。结果:应用相对定量分析法测得各组OSM的表达量,轻微病变组基因表达水平高于对照组差异无统计学意义(P>0.05);病变严重组OSM基因表达明显增多,与轻微病变组、对照组比较差异有统计学意义(p<0.05)。免疫组化中,OSM在骨关节炎病变严重组、轻微病变组膝关节滑膜组织中滑膜细胞、血管内皮细胞、单核细胞和/或淋巴细胞均有阳性表达,表现为细胞膜和/或细胞质出现棕黄色颗粒,在正常的膝关节滑膜细胞中也有少量表达。严重病变组及轻微病变组骨关节炎组滑膜组织中OSM的表达较正常组升高,严重病变组较轻微病变组和正常组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:OSM在滑膜组织中广泛存在,随着病情的加重逐渐表达增多。OSM在骨关节炎的发病过程中可能起重要作用。
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