【摘 要】
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单功能烷化剂N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)是一种在实验室中普遍使用的一种模式化学诱变剂和致癌剂,用于研究环境中广泛存在的N-亚硝氨类诱变剂和致癌剂的致癌机制,它能和
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单功能烷化剂N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)是一种在实验室中普遍使用的一种模式化学诱变剂和致癌剂,用于研究环境中广泛存在的N-亚硝氨类诱变剂和致癌剂的致癌机制,它能和DNA及蛋白质等生物大分子形成加合物(adduct),其引起的与突变有关的主要DNA损伤是O~6-甲基鸟嘌呤,这种损伤与许多肿瘤发生密切相关。但是DNA损伤并不是引起突变的必要条件,环境诱变剂引起的突变也可发生在非DNA损伤部位,即非定标性突变(nontargeted mutagenesis)。我们实验室曾用一特殊的突变检测系统,直接证明DNA损伤剂可在哺乳动物细胞诱发非定标性突变:首先用低浓度(0.2μM)的短寿烷化剂MNNG(半寿期为1.1hr)处理细胞2.5h后,继续培养24h,将重组有用作突变检测的靶基因supFtRNA基因的穿梭质粒pZ189转入细胞复制,发现在未受致癌物直接攻击的穿梭质粒中有较自发突变率高5倍以上的靶基因突变。这种突变并非在接受MNNG攻击以后立刻出现,而是具有时相依存性,在致癌物攻击后其发生率逐渐升高,在12h达最高峰,以后逐渐下降。且突变谱明显不同于由MNNG直接攻击引起的定标性突变,有其突变好发部位的序列特异性。本实验室还证明在低浓度MNNG诱发的细胞非定标性突变依赖于基因表达改变,并证明在MNNG处理细胞中有广泛的基因表达改变,伴有DNA复制保真度的下降和DNA聚合酶谱的改变。与DNA聚合酶β表达升高相关cAMP-PKA-CREB信号通路在MNNG处理细胞中被激活,且在去核细胞中也可发生,即它的激活并不依赖于基因组DNA损
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