钙网蛋白对鼻咽癌细胞EMT的影响及意义

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[目的]探讨Calreticulin表达降低对鼻咽癌细胞EMT的影响及意义。[方法]Western blot检测鼻咽癌CNE2细胞和永生化鼻咽上皮细胞NP69中Calreticulin蛋白的表达;构建si-CRT干扰载体,瞬时转染CNE2细胞(以si-control为对照),鉴定其转染效率,运用Western blot与q RT-PCR检测si-CRT对CNE2细胞中Calreticulin表达的抑制情况;观察Calreticulin表达降低后CNE2细胞的形态变化,Western blot检测Calreticulin表达降低后,CNE2细胞中EMT相关蛋白E-cad、Vimentin、TGF-β以及MMP-9的表达;Transwell小室实验检测Calreticulin表达降低对CNE2细胞迁移与侵袭的能力。[结果]1、qRT-PCR与Western blot结果显示,si-CRT可以有效干扰Calreticulin在CNE2细胞中的表达。2、Calreticulin表达降低后,部分CNE2细胞由梭形演变为扁平和鹅卵石样,且细胞排列紧密;Western blot检测结果显示,Calreticulin表达降低后,CNE2细胞中E-cad表达显著升高(P<0.05);而Vimentin、MMP-9与TGF-β蛋白的表达显著降低(P<0.05)。3、Transwell迁移侵袭实验结果显示,Calreticulin表达降低后,CNE2细胞的迁移侵袭能力明显减弱(P<0.05)。[结论]Calreticulin表达降低鼻咽癌CNE2细胞发生EMT减弱,细胞迁移和侵袭能力降低。
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