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第一部分绪论本节旨在介绍该研究的相关研究背景,并对以下内容进行了综述:蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后的脑损伤机制、核因子-κB(nuclearfactor-kappaB,NF-KB)信号通路、NF-κB与其他转录因子的关系、NF-κB与神经系统的关系、NF-κB抑制剂毗咯烷二硫代氨基甲酸(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)在临床中的作用。第二部分实验性蛛网膜下腔出血后体内外核因子-κB的双相激活SAH后NF-κB被激活已成共识,但是SAH后NF-κB激活的完整过程尚不得知。在此研究中,将培养的神经元分成对照组和6个血红蛋白(hemoglobin,Hb)处理组。制作兔一次注血SAH模型,并将兔子随机分为对照组和5个SAH 组。采用电泳迁移率变动分析(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)和免疫组化检测NF-κB活性及其在细胞内定位,实时定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测 NF-κB 下游基因 TNF-α,IL-1β,Bcl-2,caspase-3 表达。神经元特异性核蛋白(neuron-specific nuclear protein,NeuN)荧光染色和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)检测用来明确体内外的神经元损伤。在SAH后的兔脑皮层和体外培养神经元中,我们发现了 NF-κB的激活双峰,其下游基因表达也呈相应的双峰变化。兔脑皮层中的NeuN阳性细胞数在3天和10天组显著降低。Hb处理的神经元LDH显著升高,但所有的处理组之间未有明显差异。以上这些结果证实了 SAH后的NF-κB激活呈双峰变化,早期的NF-κB激活可能对神经元有损伤作用,但是晚期的激活可能不引起神经元损伤。第三部分兔蛛网膜下腔出血后核因子-κB在脑损伤中的“双向”作用在多种生理病理过程中,NF-κB都是一种重要的转录因子,其可能起到保护性或损伤性的作用。此研究中,我们旨在探究SAH后NF-κB的激活双峰在神经元损伤中的作用。本实验将80只新西兰大白兔分为对照组、SAH组、溶剂处理组、PDTC处理组,EMSA和免疫荧光分别用来检测NF-κB活性及其在细胞内定位。NF-κB下游炎性因子TNF-α,IL-1β和凋亡因子Bcl-2,caspase-3水平分别使用酶联免疫吸附分析(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和实时定量PCR检测。尼氏染色和免疫荧光染色评价神经元损伤。SAH后脑皮层中的NF-κB活性呈现双峰,炎性因子水平呈现出相同的时相改变。PDTC可以显著抑制NF-κB激活和炎性因子基因和蛋白表达,抑制早期的NF-κB活性峰可以显著增加神经元数量,但是抑制晚期的NF-κB活性峰能够显著减少神经元数量。SAH后脑皮层中的NF-κB双峰激活对神经元的损伤起到重要作用。早期的NF-κB激活起到脑损伤作用,晚期NF-κB激活起到保护性作用。