葱蝇Delia antiqua Megien(双翅目:花蝇科)是为害葱属植物的重要地下害虫,在中国以及北半球许多地区均有发生。目前,对葱蝇的防治措施主要以化学防治为主,长期使用化学药剂,不仅易使害虫产生抗药性,而且对会环境造成污染。昆虫具有发达的嗅觉系统,能够感知信息素和多种植物挥发物。目前,在多种昆虫中利用人工合成的性诱剂和植物挥发物进行监测和防治,并取得了显著的成效。感觉神经元膜蛋白SNMPs,是昆虫体内存在的一种重要嗅觉功能蛋白,在昆虫感受信息素的过程中起重要作用。因此,深入研究昆虫SNMPs功能对于开发信息素介导的害虫治理手段具有深远意义。本文以葱蝇Delia antiqua为研究对象,克隆得到了DantSNMP1的开放阅读框,并分析了该基因的系统进化。此外,本文还研究了DantSNMP1、DantSNMP2在不同组织中的表达模式,并对DantSNMP1在触角中的分布进行了免疫荧光定位,主要结果如下:1.利用同源克隆方法及RACE技术,克隆获得葱蝇SNMP1开放阅读框,将该基因命名为DantSNMP1,并提交至GenBank获得登陆号MK541687。序列分析表明,该序列开放阅读框长1608 bp,共编码535个氨基酸,推测编码蛋白分子质量为60.2 KD,等电点为5.39。通过对其跨膜区进行分析,结果表明DantSNMP1具有CD36蛋白家族的典型特征,即含有两个跨膜结构区域,且在胞外环区域含有六个保守的半胱氨酸。系统发育分析表明DantSNMP1属于SNMP1亚类,且与双翅目昆虫的SNMP1氨基酸序列具有较高的相似性(65%-78%)。2.通过实时定量PCR方法,对DantSNMP1和DantSNMP2的组织表达模式进行研究。结果表明,DantSNMP1是触角特异性的,且在雄性触角中的表达量显着高于雌性,推测其具有嗅觉功能;而DantSNMP2在触角,足和翅中均有表达,且在雄性触角中的表达量显着高于雌性,而在足和翅中的表达量在雌、雄个体中差异不显著,推测其具有嗅觉和味觉功能。3.构建原核表达载体DantSNMP1-pET-28a(+),将其导入大肠杆菌Rosetta细胞,经过诱导获得44 KD以包涵体形式存在的重组蛋白;使用重组蛋白免疫新西兰大白兔,得到具有良好免疫活性(效价:1000×2^10)的多克隆抗体。4.利用已获得的多克隆抗体对DantSNMP1在触角的分布进行免疫荧光定位研究,结果表明DantSNMP1在性信息素敏感的毛形感器表达,推测DantSNMP1在葱蝇体内具有检测性信息素的功能。