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目的:研究胃癌细胞对CD4+T淋巴细胞ThPOK表达的影响及其与CD4+T细胞亚群分化的关系,探讨胃癌免疫逃逸机制。方法:1、胃癌细胞株(SGC7901、BGC823)与CD4+T细胞株(Jurkat T淋巴细胞株)(未活化及活化)直接或Transwell间接共培养6h后,分离Jurkat T淋巴细胞,再单独培养12h后,检测各组Jurkat细胞中ThPOK、IFN-γ、IL-4、IL-17、FoxP3表达差异。2、采用慢病毒干扰技术,沉寂Jurkat细胞ThPOK的表达(即构建siThPOK-Jurkat细胞),沉寂ThPOK的Jurkat细胞不同状态下(与胃癌细胞株直接共培养)表达ThPOK、IFN-γ、IL-4、IL-17、Fox P3表达差异。结果:1、SGC7901与Jurkat细胞共培养按不同比例直接共培养,随着淋巴细胞比例升高,ThPOK mRNA表达随之升高(P<0.05)。2、且若将胃癌细胞与Jurkat T淋巴细胞共培养(直接及间接),直接共培养时Jurkat细胞中ThPOK表达明显升高,且活化时升高更显著(P<0.05)。而间接共培养时,胃癌共培养组与GES-1对照组比并无明显变化(P>0.05)。故认为胃癌细胞主要通过直接接触促进Jurkat T淋巴细胞中ThPOK表达。3、(1)对照活化组与对照非活化组相比,胃癌活化组与胃癌非活化组相比,前者共培养后Jurkat T淋巴细胞表达IFN-γ、IL-4 mRNA及蛋白均高于后者(P﹤0.05)。而FoxP3、IL-17蛋白前者与后者无明显差异(P>0.05)。(2)Jurkat淋巴细胞未活化时,胃癌非活化组与对照非活化组相比,IFN-γ、IL-4、FoxP3 mRNA及蛋白表达上调(P﹤0.05)。IL-17表达无明显差异(P>0.05)。(3)而Jurkat淋巴细胞活化时,胃癌活化组与对照活化组相比,IFN-γ、IL-4、FoxP3 mRNA及蛋白表达升高。IL-17表达无明显差异(P>0.05)。4、siThPOK-Jurkat细胞中ThPOK mRNA基因及蛋白表达明显降低(P<0.05),可用于后续试验。5、胃癌细胞、GES-1分别与活化Jurkat、活化siThPOK-Jurkat细胞直接共培养后结果如下:(1)对照沉寂组与对照活化组相比,胃癌沉寂组与胃癌活化组相比,前者IFN-γ蛋白表达明显降低(P<0.05)。胃癌沉寂组与对照沉寂组相比,前者IFN-γ表达明显高于后者(P<0.05)。(2)对照沉寂组与对照活化组相比,胃癌沉寂组与胃癌活化组相比,前者IL-4蛋白表达明显降低(P<0.05)。胃癌沉寂组与对照沉寂组相比,两组间无差异(P>0.05)。(3)对照沉寂组与对照活化组相比,胃癌沉寂组与胃癌活化组相比,Jurkat细胞分泌IL-17无统计学差异(P>0.05)。胃癌沉寂组与对照沉寂组相比,IL-17蛋白表达无统计学差异(P>0.05)。(4)对照沉寂组与对照活化组相比,胃癌沉寂组与胃癌活化组相比,前者FoxP3蛋白表达明显降低(P<0.05)。胃癌沉寂组与对照沉寂组相比,前者Fox P3表达明显增高(P<0.05)。结论:胃癌细胞可通过直接接触促进其ThPOK表达,影响CD4+T淋巴细胞亚群标志物表达;CD4+T淋巴细胞亚群在外周仍具有可塑性。