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研究背景:近百年来,由H1N1亚型流感病毒引发的流感季节性流行或大流行给人类健康和公共卫生带来持续威胁。自2009年甲型H1N1爆发以来,在世界范围内几乎每年都会导致严重的感染和死亡,目前仍是被广泛关注的全球性公共卫生问题。尽管与甲型H1N1流感病毒和疫苗相关的研究已取得重大进展,但流感病毒具有高度可变性和不确定性,因此对于甲型H1N1的防控仍面临着巨大的挑战。在流感“通用”疫苗问世之前,公共卫生监测与临床治疗仍是目前流感防控的重要手段,从公共卫生的角度全面了解其流行特征和规律,识别重点防控区域,优化流感防控资源配置尤为重要。从临床角度来看,早期的快速准确诊断对于及时启动抗病毒治疗以降低季节性流感及大流行期间与流感相关的发病和死亡以及减少临床抗生素的不当使用至关重要。研究目的:探讨江苏省2009年2019年甲型H1N1流行特征及空间分布特点,为江苏省甲型H1N1防控提供科学依据。同时以流感病毒神经氨酸酶为靶标制备单克隆抗体用于组建双抗体夹心ELISA（DAS-ELISA）检测体系,为实现流感快速确诊提供有效手段。研究方法:1.统计方法通过江苏省流感监测网络获得甲型H1N1阳性病例数据,从各地市统计年鉴中整理出各县区常住人口数作为分母计算甲型H1N1发病率。采用SPSS22.0进行卡方检验比较不同人口学甲型H1N1阳性率差异。Arc GIS 10.2软件进行空间自相关分析和结果可视化展示。其中Moran’s I（Global Moran’s I）指数和Getis-Ord General G指数反映江苏省甲型H1N1发病率全局自相关性。Local Moran’s I指数和Getis-Ord Gi*指数用于分析发病率的局部自相关性。2.实验方法用纯化的流感病毒为免疫原免疫小鼠,筛选出针对于流感病毒神经氨酸酶（NA）的单克隆抗体。基于对NA亚型流感病毒的亲和力,通过交换不同的单克隆抗体,筛选出最佳的捕获和检测配对单克隆抗体。方阵滴定法确定检测体系最佳工作条件。通过检测不同亚型流感病毒确定检测体系特异度,不同浓度的重组蛋白及不同滴度的流感病毒用于评价检测体系的灵敏度。研究结果:1.江苏省2009年2019年间甲型H1N1流感阳性病例年平均阳性率为4.0%,占流感阳性总数的1/3。其作为季节性流感流行时的流行高峰主要发生在冬季,且呈单峰分布。2.2009年2019年江苏省甲型H1N1人口学分布分析显示,甲型H1N1年平均阳性率在男女性别上差异无统计学意义（χ2=1.273,P=0.259）。各年龄组年平均阳性率差异具有统计学意义（χ2=13.570,P<0.05）,其中1525岁年龄组年平均阳性率最高为7.2%,60岁以上年龄组年平均阳性率最低为2.6%。不同职业人群年平均阳性率差异也具有统计学意义（χ2=1489.892,P<0.001）,其中学生人群年平均阳性率最高为6.3%,离退/家务及待业年平均阳性率最低为2.9%。此外,苏北地区的年发病率高于苏中和苏南地区（3.9%vs 3.9%vs 4.2%;χ2=22.020,P<0.001）。3.分年度进行人口学分析显示:除2010年女性阳性率稍高于男性外（χ2=5.854,P=0.016）,江苏省各年份甲型H1N1性别分布均无统计学差异。此外,虽然年平均检出率在学生人群中表现的最高,但是具体到每一年的阳性率在职业人群中分布来看,仅2009年学生群体较其他人群检出率高（P<0.001）。江苏省甲型H1N1无特定职业分布,但工作环境相对封闭,与公众接触较密切的职业人群阳性率较高。4.江苏省2009年2018年甲型H1N1发病率呈现波动上升趋势。2009年2018年全省总发病率呈空间随机分布状态,从局部空间自相关分析来看,扬州市的广陵区可能是甲型H1N1的高发区和聚集区。不同年份的Local Moran’s I指数分析结果显示,淮安市的清江浦区在2009、2013和2018年均出现HL分布的异常值。此外,Getis-Ord Gi*指数显示,江苏省每年的甲型H1N1发病热点区域无明显规律,但进一步观察可发现,热点地区主要分布在苏南的镇江市,苏中的扬州市、泰州市和苏北地区徐州市及宿迁市,并且以市区分布为主,且热点区域存在扩大趋势。5.以靶向禽流感H9N2神经氨酸酶的单克隆抗体建立的双抗体夹心ELISA检测体系只能检测禽流感H9N2的N2亚型流感病毒,包括从人体分离出的机会性感染H9N2流感病毒,而不能检测其他亚型或其他与HA组合的N2亚型流感病毒。且该检测该体系具有良好的灵敏度,对H9N2流感病毒的最低检出限为0.25 HAU/50μl,对rec N2的最低检测限为10ng/ml。研究结论1.江苏省甲型H1N1发病率总体呈波动上升趋势,季节性流行高峰出现在冬季。相较大流行期间,季节性流行时人群分布中2560岁年龄组人群阳性率较高。提示要进一步强化甲型H1N1流感监测力度,如在高发季节扩大监测人群,同时加大对2560岁年龄组人群及职业暴露人群的监测。2.江苏省甲型H1N1发病率呈现一定的高值聚类分布特征,且部分热点区域存在扩大趋势。提示流感防控措施的落实不仅要关注热点区域,其周边地区也应被纳为重点防控对象,同时要密切关注出现异常值区域的流感病毒流行及耐药监测。3.以流感神经氨酸酶为靶点制备单克隆抗体组建的双抗体夹心ELISA对检测H9N2亚型流感病毒具有良好的特异度和敏感度。