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背景与目的:胰腺癌的发病率在恶性肿瘤中居第14位,而死亡率高达第9位。目前,手术是胰腺癌治疗的主要手段。但由于胰腺癌早期阶段并没有明显的特异症状,患者就医时往往较晚,而同时胰腺癌具有高转移和高侵袭性、易出现化学治疗耐受等特点,严重影响了患者的治疗效果。尽管双药或三药联合疗法和新辅助治疗不断发展,但多年来胰腺癌患者5年生存率在2%到9%之间,始终没有得到显著改善。因此,采取何种指标作为参考,采取更为精准的治疗策略,已成为当前研究的热点方向。近年来,高通量分析在早期诊断、药物靶点、预后预测等生物标志物的筛选中发挥着重要作用。虽然对胰腺癌生物标志物的研究已受到广泛关注,但仍需进一步筛选具有胰腺癌预后预测能力的生物标志物并优化相关预测模型。内容与方法:本研究中,纳入2008年-2015年于天津医科大学肿瘤医院确诊并进行手术治疗的99名胰腺癌患者。基于无进展生存期(Progression-free survival,PFS)对患者进行分组,其中PFS>18个月作为预后良好组,PFS<12个月的作为预后不良组。在以上两组中各选3例,采用全基因组表达芯片分析两组间的差异表达基因(Differential gene expression,DEGs)。选取68例具有完整预后资料的胰腺癌患者,利用q RT-PCR考察候选基因表达水平与患者生存的相关性,进一步优选具有预后预测潜能的生物标志物,并利用免疫组化在蛋白水平上进行验证。随后,利用多变量分析所得潜在生物标志物和淋巴浸润、肿瘤分期等临床病理参数以及与患者生存的关系。最后,分别利用TCGA数据库和STRING在线工具考察所得潜在生物标志物影响胰腺癌进展的潜在机制。结果:(1)通过基因表达谱芯片分析在预后良好组和预后不良组的胰腺癌患者样本中筛选获得178个DEGs,在预后良好组中发现110个基因表达上调,68个基因表达下调。(2)基于DEGs差异表达倍数和现有研究报道,选取其中24个候选基因进行q RT-PCR检测,分析这些基因的mRNA水平与患者PFS和总生存期(Overall survival,OS)的相关性,最终筛选获得4个候选生物标志物,其中LOX的高表达提示不良预后,而ACSL5、TOX3、SLC44A4的高表达提示预后良好。(3)采用免疫组织化学染色(Immunohistochemistry,IHC)及双向评分系统,定量分析候选生物标志物的蛋白表达与临床指标以及患者预后的相关性,LOX表达与淋巴浸润显著相关,ACSL5的表达与肿瘤T分期具有相关性;TOX3的表达与临床分期、血管侵犯均显著相关。同时,LOX高表达、ACSL5和TOX3低表达的患者明显具有较差预后。(4)利用Pearson相关系数进行多变量分析结果进一步表明LOX和ACSL5是胰腺癌的独立预后因素,具有预后预测的应用潜能。(5)利用TCGA数据库分析LOX影响胰腺癌进展的可能分子机制,结果提示LOX与HIF-1a以及上皮间质转化(Epithelialmesenchymal transition,EMT)指标具有显著相关性,利用STRING在线工具构建蛋白-蛋白相互作用网络,结果表明ACSL5可能影响脂质代谢相关通路。结论:在这项研究中,我们对预后良好和预后不良患者的胰腺癌组织之间差异表达基因进行分析,筛选发现LOX和ACSL5是胰腺癌预后预测的潜在生物标志物,其中LOX高表达提示不良预后,而ACSL5的高表达提示预后良好。结合患者临床病理特征和分子互作网络分析结果可以推测,LOX可能通过调控肿瘤EMT过程促进肿瘤的转移,而ASCL5可能通过影响脂质代谢而参与肿瘤进展。