神经干细胞的分离培养及其分化过程基因的差异表达

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在研究神经干细胞的培养和分化过程中,使用细胞培养技术和间接免疫细胞化学方法,对体外纹状体神经干细胞培养体系的优化进行了一些有益探讨.在优化条件(如20ng/ml EGF、10mg/ml bFGF等存在)下,SD胎鼠纹状体神经干细胞能快速生长增殖;在培养液中加入胎牛血清,神经干细胞即发生分化产生分化细胞.采用cDNA点阵杂交、DDRT-PCR和反向Northern杂交等技术,研究了神经干细胞分化过程相关基因的差异表达.cDNA的点阵杂交实验结果表明,有60个基因或EST的表达与神经干细胞的分化相关,其中,在未分化细胞中优势表达的基因或ESTs有55个,在分化细胞中优势表达的有5个.在DDRT-PCR结合反向Northern杂交的实验中发现了2个与神经干细胞分化相关的新功能ESTs.已发现的62个分化相关基因或EST的结果表明,神经干细胞分化过程主要是基因的下调,此为进一步研究神经干细胞分化调控的分子机制积累了重要依据.
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