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污水、污泥等废弃物在厌氧处理过程中,释放出含有CH4的废气。厌氧条件下,甲烷能够与亚硝酸盐或硫酸盐等发生氧化还原反应,甲烷失电子氧化为二氧化碳。工业废水如造纸废水、印染废水和制药废水等往往含有大量的亚硝酸盐或硫酸盐。废水中的亚硝酸盐或硫酸盐可以作为氧化剂氧化甲烷。甲烷与亚硝酸盐/硫酸盐的氧化还原反应实质是电子转移,通过外加电压输入能量,可以辅助电子转移,提高转化速率。本研究构建甲烷厌氧氧化生物体系和电辅助生物体系,考察甲烷氧化效果,解析微生物群落和演替特征,研究物质转化和反应途径,以期实现含甲烷废气与含亚硝酸盐和硫酸盐废水的协同去除。主要研究结果如下: (1)构建甲烷氧化-亚硝酸盐/硫酸盐还原生物体系(MNS),电辅助-生物体系(E-MNS)。各生物体系对甲烷均有较好的去除效果,最大转化率分别为0.68mg/d(MNS)和4.18mg/d(E-MNS)。电子受体种类和浓度、电压影响甲烷的转化速率和转化量。当亚硝酸盐浓度为1500mg/L,硫酸盐浓度为2500mg/L,温度为30℃,pH值为7时,MNS体系甲烷减少率最高,为16.56%。电压为1.6V,温度为30℃,pH值为7时,E-MNS体系甲烷氧化效果最佳,为45.6%。电辅助促进电子传递,甲烷转化速率提高了近5倍,转化量提高57mg。 (2)采用分子生物学方法解析各个生物体系微生物群落结构,不同体系功能菌种类存在差异。MNS体系中Diaphorobacter,Hyphomicrobium,Thermomonas,Paracoccus完成反硝化;Desulfosporosinus,Desulfobulbus,Desulfomicrobium,Desulfotomaculum,Desulfuromonas完成硫酸盐还原;甲烷氧化由甲烷氧化细菌(Methylocaldum,Methylocystis)和甲烷氧化古菌(Methanosarcina,Methanococcoides,Methanomicrobia)共同完成。E-MNS体系中,除了MNS体系检出的Hyphomicrob ium,Thermomonas,Desulfosporosinus,Desulfomicrobium,Desulfotomaculum,Methylocaldum,Methylocystis,Methanosarcina,Methanococcoides,Methanomicrobia功能菌以外,电活性古菌Methanobacterium完成甲烷氧化,反硝化与硫酸盐还原过程分别由电活性细菌Dechloromonas和Desulfovibrio,Desulfobulbus,Desulfuromonas完成。随着反应时间延长,功能菌的丰度增加。 (3)对于MNS体系,接近25%的甲烷转化为二氧化碳,溶解于液相中的总有机碳(TOC)和总无机碳(IC)分别为6.28%和66.27%。其余转移到固相或被微生物利用。11.53%的硫酸盐转化为H2S,12.21%转化为S2-溶于水中。大部分硫酸盐(接近75%)转化为硫单质或被微生物利用。大于75%的亚硝酸盐转化为氮气,大约为24%转移到固相或被微生物利用,极少部分(<1%)转化为氧化亚氮。E-MNS体系中,甲烷和亚硝酸盐转化比例与MNS体系类似,硫酸盐更多的转化为硫单质或被微生物利用。 (4)MNS体系中,甲烷氧化、亚硝酸盐反硝化和硫酸盐还原的过程为:甲烷氧化细菌Methylocaldum,Methylocystis和甲烷氧化古菌Methanosarcina,Methanococcoides和Methanomicrobia共同将甲烷氧化为二氧化碳,中间产物为甲醇和其他溶解性有机物;硫酸盐还原菌Desulfosporosinus,Desulfovibrio,Desulfobulbus,Desulfotomaculum,Desulfomicrobium,Desulfuromonas和亚硝酸盐还原菌Diaphorobacter,Achromobacter,Thermomonas利用甲烷氧化过程释放的能量和电子,分别将硫酸盐和亚硝酸盐还原,硫酸盐的还原产物为S2-和硫单质,亚硝酸盐反硝化的产物为氮气和氧化亚氮。E-MNS体系中,甲烷转化、亚硝酸盐和硫酸盐还原过程与MNS体系类似,除了MNS体系中检出的功能菌以外,电活性反硝化菌Dechloromonas,电活性硫酸盐还原菌Desulfovibrio,Desulfobulbus,Desulfuromonas,以及电活性甲烷氧化菌Methanobacterium参与并促进甲烷氧化、反硝化和硫酸盐还原过程。