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酶膜耦合技术是现代工业中重要的生产手段,与传统酶解分离技术相比,具有环保、节能、高效等优点。本文采用固定化酶解耦合陶瓷膜分离技术提取猪小肠黏膜中的肝素并对分离工艺条件进行了研究,优化了离子交换吸附纯化肝素工艺条件,并探讨了低分子肝素对小鼠肠道菌群的作用。主要研究结果包括:1)采用固定化酶解耦合陶瓷膜分离技术提取肝素。以肝素透过率、固定化酶截留率和稳定膜通量为指标,对陶瓷膜分离回收固定化酶工艺条件进行研究。在单因素实验的基础上,采用正交优化法确定最佳工艺条件:选用800nm孔径陶瓷膜过滤肝素固定化酶解液,操作压力为0.3MPa,温度为40℃,流速为2m/s,pH为11。在此条件下,肝素透过率为92.5%,固定化酶不能透过,平均膜通量为656.13 L·m-2·h-1。选用2%NaOH作为清洗剂清洗陶瓷膜,可将陶瓷膜水通量恢复至初始水通量的97.9%,符合陶瓷膜清洗要求。对固定化酶进行重复提取回收,固定化酶重复提取回收2次,肝素提取率达到回收前的80.6%,提取肝素的效果仍然较好。2)以肝素吸附率和洗脱率为指标,对离子交换树脂纯化肝素工艺条件进行了研究。根据单因素实验和响应面分析法确定了树脂静态吸附洗脱肝素的最优工艺条件:吸附温度44℃,树脂质量分数0.30%,吸附时间5h,料液pH为8,选择4mol/L氯化钠溶液作为洗脱剂,树脂:氯化钠溶液（w/v）为1:3,最佳洗脱时间为3h。在此条件下得到肝素的树脂吸附率为97.75%,洗脱率为99.1%。在树脂静态吸附洗脱最优条件的基础上,通过单因素试验确定了树脂动态吸附和洗脱条件:上样量为156BV,上样流速1BV/h,洗脱流速为1.5BV/h,并对制备得到的肝素钠样品进行了质量分析,与市售粗品肝素钠相比,固定化酶膜耦合法制备得到的肝素钠样品具有一定优势。3)给BALB/C小鼠皮下注射低分子肝素,设置空白对照组和生理盐水条件对照组,分别收集低分子肝素组和对照组小鼠新鲜粪便,采用高通量宏基因组技术对小鼠肠道菌群结构组成进行分析,研究低分子肝素对小鼠肠道菌群的影响。结果表明,低分子肝素对小鼠肠道菌群的组成具有一定影响。其中低分子肝素能够促进小鼠肠道内Clostridium XlVa菌属和Alistipes菌属等有益菌的增殖,对γ-变形菌纲细菌有一定抑制作用。