饲料牛磺酸对斜带石斑鱼TauT基因表达的影响

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石斑鱼(Epinephelus)是一种经济价值很高的暖水性海水鱼类,在我国福建、广东、海南等沿海地区养殖规模很大。石斑鱼牛磺酸合成能力较弱,主要靠外源食物供给来满足其生长发育的需要。牛磺酸转运蛋白(taurine transporter,TauT)是牛磺酸跨膜转运的重要载体,在鱼类的生长、代谢及性成熟过程中发挥着重要作用。本文克隆了斜带石斑鱼TauT基因及饲料中不同牛磺酸水平对斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)组织TauT mRNA表达的影响。主要研究结果如下:1、斜带石斑鱼TauT基因克隆首次从斜带石斑鱼肝脏中分离得到TauT基因编码区序列全长,长度为1881bp,编码626个氨基酸,其分子质量为70126.80Da,等电点为7.834。通过对其氨基酸序列分析发现,斜带石斑鱼TauT具有12个跨膜区域,且在第三跨膜区域与第四跨膜区域之间存在这一个亲水基环,这个环含有三个潜在的N-糖基化位点。通过同源性分析和系统发育分析,斜带石斑鱼TauT基因与鲈鱼亲缘关系最近,其次为大西洋鲑,再次为罗非鱼,与其斑马鱼和鲤鱼等其它淡水鱼类亲缘关系较远,而与鸟、哺乳类的亲缘关系则更远。这符合传统分类学意义。2、组织表达分析检测了斜带石斑鱼不同组织的TauT mRNA表达水平。结果发现,TauT mRNA在所有被测组织中都有表达,但在不同组织的表达水平不一致,以肝脏、心脏、脑表达水平最高,肾脏、鳃、脾脏组织的表达次之,以肠道、肌肉、脂肪组织的表达水平为最低。3、饲料牛磺酸对斜带石斑鱼生长的影响本实验配制牛磺酸含量为0(D1)、0.5%(D2)、1%(D3)、1.5%(D4)的4种试验饲料,饲喂斜带石斑鱼84d,并分别于饲喂的第28d、56d、84d称重和采样。结果表明,无论饲喂的第28d、第56d还是第84d,牛磺酸添加组鱼的增重率均显著高于对照组,且1%牛磺酸添加组增重率显著高于其他(p<0.05)。随着饲料牛磺酸水平的升高,斜带石斑鱼肝脏、肌肉、肠道牛磺酸含量显著增高(p<0.05),且随着养殖d数的增加而增加(p<0.05)。4、饲料牛磺酸对斜带石斑鱼TauT mRNA表达的影响在饲喂的第28d时,牛磺酸添加组鱼各个组织的TauT mRNA相对表达量显著高于对照组。D3、D4组的TauT mRNA相对表达量显著高于D1、D2组(p<0.05),但D3组的表达量与D4组差异不显著(p>0.05)。饲喂的第56d、84d各组TauT相对表达量呈现出与饲喂第28d时一致的结果。同一组织TauT mRNA的相对表达量随着饲喂时间的增加呈现逐渐下降的趋势。
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