大肠杆菌胞外囊泡对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞增殖凋亡、迁移影响的实验研究

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目的:研究大肠杆菌胞外囊泡(E.coli-OMVs)对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞增殖、凋亡和迁移的影响,为神经母细胞瘤寻找新的治疗药物。方法:采用差速离心法提取大肠杆菌胞外囊泡,观察囊泡形态并测定囊泡粒径范围。随机分为4组:正常对照组、胞外囊泡低剂量组(100μg/mL E.coli-OMVs)、胞外囊泡中剂量组(500μg/mL E.coli-OMVs)和胞外囊泡高剂量组(1000μg/mL E.coli-OMVs)。MTT检测各组细胞增殖能力;TUNEL和Western Blot分别检测各组细胞凋亡情况及凋亡相关蛋白cleaved-caspase3的表达;Transwell检测各组细胞迁移能力。结果:透射电镜下E.coli-OMVs呈双层膜、中空、圆形或椭圆形,其内含低密度或高密度物质,具有明显的异质性,粒径分析结果表明其直径分布在30-450nm。与对照组相比,经E.coli-OMVs干预后,SK-N-SH细胞增殖能力显著降低;细胞凋亡增加,cleaved-caspase3蛋白表达水平明显上调;而迁移能力显著降低(P<0.05)。结论:E.coli-OMVs对SK-N-SH细胞具有直接杀伤作用,有望成为神经母细胞瘤的治疗药物。
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