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茶树作为叶用木本植物,其通过芽体的休眠来抵抗冬季的低温,而春季茶芽萌发的早迟又影响茶叶经济效益的高低。所以研究茶树越冬芽休眠形成及解除的机理是必要的。研究发现植物休眠解除的前提是内源ABA含量的快速降低,但有关这种现象的分子机理还不清楚。本研究通过RACE法克隆了茶树中ABA分解代谢关键酶—ABA 8’-羟化酶和ABA β-葡萄糖基转移酶的基因,分别命名为CsCYP707A1a、CsCYP707A1b、CsCYP707A2、CsCYP707A3、CsCYP707A4和CsAOG。通过 qRT-PCR 分析了CsCYP707As和CsAOG在茶树芽、叶、茎及根组织中表达规律。研究了乌牛早和石佛翠在温度及植物生长调节剂处理时CsCYP707As基因的表达情况,分析了CsCYP707As应答低温/高温、GA/ABA和PEG时的表达变化。这些结果为进一步了解ABA在茶树应激反应和休眠与萌发中的作用提供了新的见解。完成的主要研究工作和成果总结如下:1)在茶树中克隆了 ABA分解代谢关键的6个基因。其中CsCYP707A1a和CsCYP707A1b有7个外显子,CsCYP707A3和CsCYP707A4有9个外显子。预测CsCYP707As蛋白定位于叶绿体。CsAOG无内含子,亚细胞定位于细胞质。2)茶树CsCYP707As序列含有CYP707A必需的特征基序,在序列N端附近有一个跨膜结构。CsCYP707As与甜橙、桃树和葡萄CYP707As亲缘关系较近。茶树CsAOG具备葡萄糖基转移酶(UDPGT)结构域,整个序列中包含9个保守元件。3)在25℃环境下,乌牛早比石佛翠提前约10 d打破休眠。15℃温度下,乌牛早和石佛翠在26 d之后才相继打破休眠。热激处理是打破茶树休眠的有效途径。GA处理能促进茶苗萌发,ABA处理抑制迟芽种石佛翠茶苗萌发。4)CsCYP707A1a和CsCYP707A1b在根中表达量显著高于芽、叶和茎。CsCYP707A3受外源GA和ABA诱导显著上调。CsCYP707A1a响应低温(4℃)显著上调,CsCYP707As受高温(38℃)诱导显著下调。CsCYP 70 7As受PEG诱导表达,复水后表达量上调。CsAOG主要参与调节越冬前期ABA含量的变化。