目的从临床、分子、细胞水平上探讨肝细胞内FFA的沉积对肝脏胰岛素抵抗的作用,为2型糖尿病的诊治提供新的思路。方法1.收集病例:本研究选择2016年12月至2017年11月期间在南通大学附属医院内分泌科住院的2型糖尿病患者,年龄30岁至70岁。按照排除标准去除不合适病例后,根据腰围分为腹型肥胖组(病例组)和非腹型肥胖组(对照组)两组。收集资料包括患者基本资料、临床检验检查资料、既往病史及生活习惯资料。分析腹型肥胖与糖尿病的相关性。2.建立细胞模型:在不含胎牛血清的DMEM培养基中,加入0.25mM棕榈酸(PA)刺激HepG2细胞24h。采用免疫共沉淀(IP)检测Prdx1与GRP78之间的相互作用,利用免疫荧光了解细胞内共定位;以Flag-Prdx1质粒、Flag质粒转染HepG2细胞,然后给予PA刺激,通过IP检测Flag-Prdx1与GRP78之间的相互作用。用Flag-Prdx1、Flag、si-Prdx1、si-CON转染细胞,通过Werstern blot和qRT-PCR检测p-AKT、p-GSK3β、GRP78、p-IRE1α、PEPCK、G6Pase表达水平,通过葡萄糖比色/荧光检测试剂盒检测细胞葡萄糖摄取水平,通过油红O染色检测细胞内脂质堆积情况。借助SPSS 20.0软件进行统计学分析处理,P<0.05具有统计学意义。结果1.本研究共纳入研究对象108例,腹型肥胖组(病例组)和非腹型肥胖组(对照组)各54例。单因素分析,两组间比较显示,腹型肥胖组高血压患者较非腹型肥胖组多,差异有统计学意义。两组间在体重、BMI、腰围、腰高比、空腹血糖、空腹胰岛素、空腹C肽、TG、HDL-C及脂肪肝各指标比较有差别,且差别有统计学意义。将空腹血糖与腹型肥胖相关指标(体重、BMI、腰围、腰高比、TG、HDL-C、脂肪肝)进行Pearson相关系数分析,结果显示空腹血糖与体重、腰高比、TG、脂肪肝呈正相关,差别有统计学意义。将血糖与腹型肥胖相关指标带入多重线性回归模型,进一步得出结论:空腹血糖随体重、腰高比、TG、脂肪肝增加而增高。2.内源性IP实验结果显示Prdx1可以与GRP78发生相互作用,并且在胰岛素抵抗状态下,两分子共同定位在胞质中。在胰岛素抵抗的HepG2细胞中转染si-Prdx1,在阻断Prdx1表达后,除了既往研究中发现的胰岛素信号通路蛋白AKT、GSK3β磷酸化水平上升外,我们还发现内质网应激蛋白GRP78表达水平增高,而IRE1α活化水平降低。在胰岛素抵抗的HepG2细胞中转染Flag-Prdx1、si-Prdx1,通过油红染色、葡萄糖检测试剂盒、PCR技术,我们发现Prdx1过表达可加剧脂滴聚集、增加糖异生过程,并抑制葡萄糖摄取。抑制Prdx1表达时葡萄糖摄取增加,而脂质堆积、糖异生得到改善。结论2型糖尿病腹型肥胖患者较非腹型肥胖患者糖代谢紊乱更严重,根源之一就是肝脏脂肪沉积。肝脏脂肪沉积可活化Prdx1,加剧内质网应激,促进肝脏胰岛素抵抗的发生发展。