流式细胞学鉴定乳腺癌中γδT细胞与其临床病理相关因素分析

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目的:1.流式细胞学分析乳腺癌肿瘤浸润淋巴细胞、外周血中γδT细胞含量;2.对γδT细胞与各临床病理相关因素进行分析;3.初步探索人体乳腺癌中IL-17的分泌情况。方法:收集41例乳腺癌病人的新鲜人体乳腺癌组织标本及其相应的正常乳腺组织标本、外周血标本,另外收集30例正常人外周血标本,提取各标本中的淋巴细胞,用CD3-APC和γδTCR-PerCP-CyTM5.5两种流式抗体标记CD3~+细胞及γδT细胞,流式细胞学分析各组中CD3~+细胞及γδT细胞含量。取41例中10例乳腺癌肿瘤悬液用CD3-APC和IL-17-PE两种流式抗体标记CD3~+细胞及分泌IL-17的细胞。结果:1.41例乳腺癌组织中均有CD3~+细胞,平均比例为33.25%,而正常乳腺组织中仅9例存在CD3~+细胞,平均比例为1.41%,差异显著(P<0.05);乳腺癌肿瘤浸润淋巴细胞中CD3~+细胞含量与乳腺癌分子分型、病理分级、淋巴结受累情况相关,三阴性乳癌较luminalA、B型CD3~+细胞含量高,低分化组较高分化组CD3~+细胞含量高,淋巴结阳性组较阴性组CD3~+细胞含量高;2.41例乳腺癌肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)中均存在γδT细胞,其平均比例为10.72%,而正常乳腺组织仅有3例样本检测到了γδT细胞,其平均比例为0.23%,乳腺癌肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)中γδT细胞含量明显高于正常乳腺组织(P<0.05)。乳腺癌肿瘤浸润淋巴细胞中γδT细胞含量与分子分型、病理分级、淋巴结转移情况、HER-2表达情况及乳腺癌中CD3~+细胞含量相关(P<0.05)。三阴性乳癌较LuminalA、B型γδT细胞含量高,低分化组较高分化组γδT细胞含量高,淋巴结阳性组较阴性组γδT细胞含量高,HER-2阳性组较阴性组γδT细胞含量高,乳腺癌中γδT细胞含量与CD3~+细胞含量呈正相关;3.41例乳腺癌患者外周血PBMC中均有γδT细胞,其平均比例为6.22%,30例正常人外周血PBMC中也存在有γδT细胞,其平均比例为4.44%,二者差异显著(P<0.05)。乳腺癌外周血PBMC中γδT细胞比例与患者肿瘤大小、年龄、淋巴结转移情况、病理分级、ER、PR、HER-2的表达情况均无明显相关(P>0.05),与乳腺癌组织中γδT细胞含量无明显相关(P>0.05)。4.10例肿瘤细胞悬液中,4例有IL-17的分泌,说明了乳腺癌肿瘤浸润CD3~+淋巴细胞分泌IL-17而非肿瘤细胞。结论:1.乳腺癌肿瘤浸润淋巴细胞中CD3~+T细胞含量明显高于正常乳腺组织,与乳腺癌分子分型、病理分级、淋巴结受累情况相关;2.乳腺癌肿瘤浸润淋巴细胞中的γδT细胞含量明显高于正常乳腺组织,与乳腺癌分子分型、病理分级、淋巴结受累情况、HER-2表达情况呈相关,与乳癌中CD3~+T细胞含量呈正相关;3.乳腺癌患者外周血PBMC中γδT细胞比正常人含量高,但其与乳腺癌各项临床病理指标及乳腺癌中的γδT细胞含量未见明显相关。4.肿瘤浸润淋巴细胞而不是肿瘤细胞分泌IL-17。
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