【摘 要】
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本研究的目的是以绵羊皮肤成纤维细胞为供体，绵羊卵母细胞为受体，生产克隆绵羊。建立了绵羊皮肤成纤维细胞系，比较了不同激活方法对绵羊卵母细胞的孤雌激活，并在此基础上较为深入
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本研究的目的是以绵羊皮肤成纤维细胞为供体，绵羊卵母细胞为受体，生产克隆绵羊。建立了绵羊皮肤成纤维细胞系，比较了不同激活方法对绵羊卵母细胞的孤雌激活，并在此基础上较为深入研究了影响绵羊体细胞核移植过程的供体细胞所处状态、融合条件等各个环节。
采用组织块培养法和分离单细胞法培养绵羊皮肤成纤维细胞，组织块优于分离单细胞法；对F5、FlO代的细胞分别作生长曲线及核型分析，发现F5、F10的生长曲线基本符合细胞生长曲线，90％、84％的细胞染色体核型保持正常的倍数(2n=54)。
电激活、离子酶素联合6-DMAP、7％乙醇联合6-DMAP都可以有效地激活绵羊卵母细胞，其卵裂率分别为60.93％、79.96％、78.28％，囊胚率分别为5.27％、18.51％、15.80％。
血清饥饿、汇合、冷冻三种方法处理的成纤维细胞作为核供体融合率为45.79％、43.78％、43.76％；卵裂率为55.77％、52.98％、43.48％；桑椹胚率为44.42％、42.48％、41.16％。
核移植重构胚412枚，移入54只受体羊，有11只羊妊娠。
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