CIK细胞治疗妇科恶性肿瘤的近期疗效观察

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目的:观察回输体外培养的自体细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer cells, CIK)治疗妇科恶性肿瘤的近期临床疗效及CIK细胞回输的安全性。方法:(一)体外实验分离8例健康者抗凝外周血,获得单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMC),用相应的诱导因子体外诱导CIK细胞。自CIK细胞培养的第1天到第20天,用台盼兰拒染法动态监测CIK细胞的增殖情况。于培养的第14天,取CIK细胞作为效应细胞,卵巢癌SKOV3细胞株、宫颈癌Hela细胞株、子宫内膜癌Ishikawa细胞株分别作为靶细胞,用乳酸脱氢酶释放法(lactate dehydrogenase, LDH)检测在不同效靶比的情况下CIK细胞对各肿瘤细胞株的杀伤率。(二)临床试验选择8例妇科恶性肿瘤患者,分离其外周血,获得单个核细胞,用相应的细胞因子体外诱导CIK细胞。将培养成熟的CIK细胞分3次回输给病人。自培养第1天到第14天,用台盼兰拒染法动态监测CIK细胞的增殖情况。回输前及回输后2个月抽取患者外周血,用流式细胞技术检测其免疫功能,包括T细胞亚群、自然杀伤细胞(natural killer, NK)、NK样T细胞(natural killer T cell, NKT)和调节T细胞检测。观察回输前及回输后2个月患者血清CA-125值。观察回输前及回输后2个月检测患者卡式评分及一般状况的变化。回输前后随时监测血、生化等常规检查,密切观察不良反应。选择6例妇科恶性肿瘤患者作为对照组,行第1周期化疗前及化疗后7-10天抽取患者外周血,用流式细胞技术检测其化疗前后免疫功能的改变,包括T细胞亚群、自然杀伤细胞、NK样T细胞和调节T细胞检测。结果:(一)体外实验在γ-干扰素、CD3单抗及白介素-2的作用下,CIK细胞增殖显著;在2.5:1-40:1的效靶比范围内,随着效靶比增高,CIK细胞对各肿瘤细胞株的杀伤作用增强(P<0.05)。(二)临床试验回输后2个月,实验组免疫功能检测显示:外周血CD4+/CD8+比值增加(P<0.05), CD3-CD16+CD56+细胞所占百分比增加P<0.05), CD4+CD25+T细胞所占百分比降低(P<0.05);对照组第1周期化疗前后免疫功能检测显示:外周血CD3+T细胞、CD4+/CD8+比值降低(P<0.05), CD3-CD16+CD56+细胞所占百分比降低(P<0.05);回输后2个月,5例病例血清CA-125值下降;回输后2个月,1例病例卡氏评分上升;回输后2个月,5例病例自觉有临床症状缓解;回输过程中及回输后无病例出现回输不良反应。结论:(1)回输自体CIK细胞对治疗妇科恶性肿瘤有一定近期疗效。(2)CIK细胞抗肿瘤治疗无明显不良反应,是安全的。
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