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目的:利用小鼠Lewis肺癌模型,探讨CD4~+CD25~+Treg细胞在Lewis肺癌生长、侵袭与转移中的作用并阐明相关的作用机制。方法:1、建立小鼠Lewis肺癌的皮下移植瘤模型,通过回输CD4~+CD25~+Treg细胞观察肿瘤的生长及存活情况。HE组织化学染色观察皮下肿瘤组织向远隔肺部转移的结节形成数量。2、通过体外CD4~+CD25~+Treg细胞和LLC共培养以及CCK8染色观察CD4~+CD25~+Treg细胞对肿瘤细胞的增殖影响;通过Transwell实验判断其对LLC胞的迁移和侵袭能力的影响。3、利用免疫组化染色技术、体内CD4~+CD25~+Treg细胞清除实验和流式细胞术等方法判定CD4~+CD25~+Treg细胞和肿瘤相关巨噬细胞的组织定位、肿瘤浸润CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg细胞表面表达CD73和CD39分子情况以及CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg细胞与肿瘤相关巨噬细胞的相互作用关系;4、利用细胞回输技术、瘤内腺苷受体阻断技术以及流式细胞仪等方法明确腺苷/腺苷受体途径在CD4~+CD25~+Treg细胞调控肿瘤浸润巨噬细胞极化中的作用地位。5、利用细胞共培养、流式细胞术以及Q-PCR等方法体外验证CD4~+CD25~+Treg细胞通过腺苷/腺苷受体途径与巨噬细胞的相互作用的特点。结果:1、流式细胞术检测结果显示:荷瘤小鼠脾脏中的CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg细胞数量明显高于正常对照组。经尾静脉回输CD4~+CD25~+Treg细胞促进肿瘤的生长,降低荷瘤小鼠的生存率。并且,回输CD4~+CD25~+Treg细胞后荷瘤小鼠的肺部转移性肿瘤结节数量显著增多。2、CD4~+CD25~+Treg细胞和LLC共培养的实验结果显示:CD4~+CD25~+Treg细胞不直接促进LLC增殖、迁移和侵袭能力。3、荷瘤小鼠肿瘤组织的免疫组织化学染色的实验结果表明:肿瘤组织中CD4~+FoxP3~+Treg细胞周围存在F4/80~+巨噬细胞。清除荷瘤小鼠体内CD4~+CD25~+Treg细胞后肿瘤相关巨噬细胞数量增加,细胞表面共刺激分子表达CD80、CD86和CD40分子水平增高。4、流式细胞仪检测结果显示:荷瘤小鼠肿瘤组织中CD4~+CD25~+Treg细胞表达高水平CD73和CD39分子;5、瘤内腺苷-腺苷受体途径阻断实验结果显示:瘤内注射腺苷受体阻断剂后抑制Lewis肺癌生长;并且,流式细胞仪技术检测结果显示:瘤内注射腺苷受体阻断剂后肿瘤相关巨噬细胞表面1A/E、CD80和CD86等分子表达水平升高;6、CD4~+CD25~+Treg细胞和腹腔巨噬细胞体外共培养的结果显示:CD4~+CD25~+Treg细胞增强巨噬细胞Arg1、MMP9以及VEGF的表达水平;相反地,阻断腺苷受体后抑制巨噬细胞Arg1、MMP9以及VEGF分子的表达水平。结论:CD4~+CD25~+Treg细胞促进Lewis肺癌的生长、侵袭与转移;CD4~+CD25~+Treg细胞通过调控肿瘤相关巨噬细胞促进Lewis肺癌的增殖和迁移和侵袭;CD4~+CD25~+Treg细胞通过腺苷-腺苷受体途径调控肿瘤浸润巨噬细胞的M2极化,进而促进Lewis肺癌的生长和侵袭和转移。