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目的 1:从人脐带组织分离和培养脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymalstem cells，UC-MSCs)，探讨其分离方法、培养条件、细胞表型以及多向分化潜能等生物学特征。 2:构建sTNFRⅡ-gAD基因修饰的间充质干细胞，探讨其原有的免疫调节性能和新获得的抵抗高浓度TNFα的能力。 3:应用sTNFRⅡ-gAD基因修饰的间充质干细胞治疗小鼠胶原诱导型关节炎，探讨其在体内的发挥免疫调控作用的机制。 方法: 1:①建立分离培养方法:组织块贴壁法分离培养脐带间充质干细胞。②细胞生长及增殖曲线的测定③流式细胞术检测免疫表型④诱导分化培养检测其分化潜能。 2:通过脂质体转染的方法，将sTNFRⅡ-gAD质粒转入间充质干细胞，G418筛选获取稳定表达sTNFRⅡ-gAD融合蛋白的MSCs。不同浓度的IFNγ刺激，流式细胞术检测其表面分子ICAM-1和胞内IDO的表达，来研究其原有免疫调节性能。不同浓度的TNFα刺激，流式细胞术检测其表面分子ICAM-1表达，来研究其抵抗高浓度TNFα的能力。 3:牛Ⅱ型胶原+完全弗氏佐剂诱导小鼠关节炎。腹腔注射sTNFRⅡ-gAD基因修饰的间充质干细胞对其进行治疗。观察小鼠关节肿胀，测量记录足掌厚度，进行临床评分。测量小鼠血清炎症因子浓度。分离小鼠脾脏，流式细胞术检测Treg比例。 结果: 1:通过组织块贴壁法分离培养得到纤维养贴壁生长细胞，传代后，生长至90％汇合度呈现典型漩涡状;流式细胞术检测其免疫表型显示，表达间质细胞表面标志(CD29，CD44，CD73，CD90，CD105)，表达MHC-Ⅰ类分子;不表达造血细胞标志，CD34，CD45，不表达MHC-Ⅱ类分子;诱导分化培养表明其具有成骨和成脂分化能力。 2:通过脂质体转染，G418筛选，成功得到稳定表达sTNFRⅡ-gAD融合蛋白的MSCs。基因修饰没有影响MSCs的免疫表型和IFNγ刺激对其免疫调节分子ICAM-1和IDO的上调作用。基因修饰使间充质干细胞获得了抵抗高浓度TNFα的新功能。 3:小鼠关节炎造模成功。腹腔注射sTNFRⅡ-gAD基因修饰的间充质干细胞治疗减轻了其严重程度。降低了其炎症因子水平。促进了其脾脏Treg的产生。 结论: 1:成功分离和培养脐带组织间充质干细胞 2:成功获得既保持原有免疫调节性能，又能抵抗高浓度TNFα的间充质干细胞 3:sTNFRⅡ-gAD基因修饰的间充质干细胞抑制了关节炎症和CIA的发展。