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目的探讨在中性粒细胞性哮喘小鼠模型上,芹菜素(Apigenin)能否发挥治疗作用并研究其可能的分子机制。方法BALB/c小鼠随机分组:正常组(Control)、中性粒细胞性哮喘组(OVA+LPS)、芹菜素不同剂量治疗组(5、10mg/kg组,简称A5、A10组)和溶剂对照组(DMSO组,Dimethyl sulfoxide,二甲基亚讽),每组7只。于第0、1、2和7天经鼻滴入20 μL溶液(含OVA 75 μg和LPS 10μg)使小鼠致敏,于第14、15、21、22天经鼻滴入20 μL溶液(含OVA 50 μg)激发小鼠哮喘发作。中药治疗组和溶剂对照组于每次经鼻激发前30 min,分别经腹腔注射芹菜素(5、10 mg/kg)和DMSO溶液各200μL,Control组以等体积的磷酸盐缓冲液(phosphate-buffered saline,PBS)代替致敏液和激发液经鼻滴入。末次激发24 h后,评估小鼠的气道炎症和气道高反应性(Airway hyperresponsiveness,AHR),检测辅助性T细胞(Helper T cell,Th细胞)相关因子的分泌,检测肺组织中Th细胞分化比例、肺组织中中性粒细胞(Neutrophil,Neu)浸润程度和Neu原位凋亡情况。提取人外周血Neu,不同浓度芹菜素和(或)不同炎性因子作用于Neu,通过流式细胞术、细胞形态学检测细胞凋亡的情况,采用蛋白质印迹法(Western blot,WB)检测活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleaved cysteine aspartic specific proteases 3,cleaved-caspase 3,cc3)、Mcl-1(Myeloid cell leukemia-1)和 Bax(B-cell lymphoma-2(Bcl-2)-Associated X)蛋白表达水平。结果(1)芹菜素减轻哮喘小鼠气道炎症并降低肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中炎性细胞尤其Neu的浸润(P<0.05)。芹菜素组小鼠气道反应性较哮喘组显著下降,同时芹菜素组小鼠血清中OVA特异性IgE(OVA-specific IgE,OVA-sIgE)显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)芹菜素降低Th1和Th17相关细胞因子如干扰素Y(Interferon-c,IFN-Y)和白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)、白细胞介素17A(Interleukin-17A,IL-17A)的表达,降低中性粒细胞性哮喘小鼠肺组织中Th1和Th17细胞的比例(P<0.05)。芹菜素减轻肺组织中Neu的浸润,同时促进Neu的原位凋亡(P<0.05)。(3)芹菜素呈浓度依赖性和时间依赖性诱导Neu凋亡,并呈现相应的形态学变化,同时芹菜素可以逆转炎性因子如脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、DNA中非甲基化胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤基序(CpG containing DNA,CpG-DNA)或IFN-了对Neu的凋亡延迟作用(P<0.05)。芹菜素诱导的Neu凋亡是半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)依赖性的,芹菜素可以促使Neu中cleaved-caspase 3、Bax表达水平明显增加,Mcl-1表达水平明显降低(P<0.05),同时芹菜素的促凋亡作用可被半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶抑制剂Q-VD-OPh和z-VAD-fink减弱,差异有统计学意义(P<0.05)。结论芹菜素对中性粒细胞性哮喘有治疗作用,这可能与其调节Th细胞分化和诱导Neu的凋亡有关。