【摘 要】
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大量研究已经表明,许多革兰氏阴性细菌应用群体感应(Quorumsensing,QS)系统,通过感应扩散性小信号分子—乙酰基高丝氨酸内酯(N-acylhomoserine lactones,AHLs),以种群密度依赖的方式调控基因表达,全局调控植物相关细菌的多种表型,如毒力因子和生防因子的产生、次生代谢产物和抗生素的分泌、运动性和生物膜的形成等。Serratia plymuthica菌株HRO-C4
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大量研究已经表明,许多革兰氏阴性细菌应用群体感应(Quorumsensing,QS)系统,通过感应扩散性小信号分子—乙酰基高丝氨酸内酯(N-acylhomoserine lactones,AHLs),以种群密度依赖的方式调控基因表达,全局调控植物相关细菌的多种表型,如毒力因子和生防因子的产生、次生代谢产物和抗生素的分泌、运动性和生物膜的形成等。Serratia plymuthica菌株HRO-C48和G3分别分离自油菜根际和小麦内茎,都是可以产生吲哚乙酸的植物促生细菌,主要通过产几丁质酶、蛋白酶和抗生素硝吡咯菌素抑制植物病原真菌。本论文首先在S.plymuthica HRO-C48中,运用同源重组的策略,构建编码信号分子基因spsI和编码信号受体基因spsR的单,双重突变体,调查分析了SpsR和SpsI的功能。另一方面通过在S.plymuthica G3中异源表达AiiA内酯酶编码基因,通过QS信号淬灭的策略降解信号分子,进一步证实了QS系统调控的表型。主要研究结果如下:1)通过生物信息学分析和分子克隆得到S.plymuthica G3菌株中2个群体感应系统splIR和spsRI基因序列(GenBank登录号分别是FJ919305和FJ919306),并进行了系统进化分析。2)检测野生菌G3和淬灭菌G3/pME6863-aiiA以及对照菌株G3/pM6000的胞外酶、运动性、生物膜和抑菌活性等生防相关表型,表明QS正调控蛋白酶和几丁质酶活性、抑菌活性、生物膜的形成,但对swimming运动性几乎没有影响。3)比较分析野生菌HRO-C48和突变株的次级代谢产物、生物膜和运动性,检测结果表明信号合成酶SpsI正调控蛋白酶、抑菌活性、生物膜形成和swimming运动性,而信号受体SpsR可能是一个抑制子。以上研究结果具有一定的理论价值和实践意义,并为遗传操纵生防细菌OS信号改良其生防效率和稳定性提供新策略。
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