D0K3在早期胃癌及癌前病变的表达及对HGC-27胃癌细胞增殖、侵袭迀移能力的影响和胃上皮内瘤变内镜活检与切除病理差异分析

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目的探索DOK3在早期胃癌及癌前病变的表达及对HGC-27胃癌细胞增殖、侵袭迁移能力的影响。方法通过免疫组织化学方法,检测35例慢性浅表性胃炎、13例JLGIN、38例HGIN.24例EGC组织DOK3表达水平。应用real time PCR和Western Blot技术检测3种胃癌细胞系DOK3 mRNA及蛋白水平的表达,之后应用RNA干扰技术以Lipofectamine(?) RNAiMAX介导靶向DOK3的siRNA转染人胃癌细胞,应用CCK-8、细胞划痕实验分析转染前后肿瘤细胞的增殖、侵袭迁移等细胞表型的变化。结果(1)DOK3在慢性浅表性胃炎组、LGIN组、HGIN组、EGC组阳性表达率分别为80%、61.5%、52.5%、37.5%。HGIN组和EGC组中DOK3的阳性表达率均明显低于慢性浅表性胃炎组(P<0.05),而慢性浅表性胃炎组与LGIN组、LGIN组与HGIN组之间差异均无统计学意义(P>0.05)(2)DOK3在胃癌细胞中呈低表达,其表达量由高到低分别为:HGC-27、MGC-803、AGS。(3)应用RNA干扰技术行HGC-27胃癌细胞DOK3基因敲降后,CCK-8实验显示敲降DOK3后可明显促进胃癌细胞增殖(P<0.05),细胞划痕实验显示其侵袭迁移能力明显增强(P<0.05)。结论(1)DOK3在EGC和HGIN中的阳性表达率明显低于慢性浅表性胃炎、LGIN组织中的表达,提示DOK3可能是胃癌变早期重要生物学事件,其可能参与了癌前病变癌变及胃癌的发生、发展,可能具有一定分子生物学诊断价值。(2)DOK3基因敲降后,其mRNA和蛋白水平显著降低,可促进HGC-27胃癌细胞增殖及侵袭迁移能力,提示DOK3可能为一抑癌基因。目的胃上皮内瘤变是胃癌的癌前病变。随着内镜下切除病变的发展,目前依靠内镜下活检病理诊断胃上皮内瘤变是有争议的。本研究的目的是比较分析胃镜活检(Endoscopic forceps biopsy, EFB)和内镜下切除(Endoscopic resection, ER)病理检查诊断胃上皮内瘤变的价值。方法选取本院2010年1月-2015年3月内镜下活检病理诊断为胃上皮内瘤变患者98例,包括20例LGIN,65例]HGIN,13例EGC。所有患者均行内镜下切除术。分析术前术后病理差异率、临床特征和内镜表现。结果EFB与ER病理总体差异率为55.1%。20例术前活检病理为LGIN患者,ER后7例诊断为HGIN(35%,7/20),5例诊断为胃癌(25%,5/20)。65例术前活检病理诊断为HGIN, ER后38例诊断为胃癌38例(差异率:58.5%,38/65)。病变大小>2cm,表面充血是术前术后病理差异的主要因素(P<0.001,P<0.05)。结论内镜下活检明确诊断胃上皮内瘤可靠性欠佳。内镜下切除不仅是作为治疗胃上皮内瘤变的主要手段,也是明确组织学诊断的一个重要方法。
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