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目的:观察罗格列酮对胃癌裸鼠移植瘤LIMK1、uPA表达的影响,及LIMK1与uPA之间的关系。方法:应用HE染色对各组瘤体组织形态结构进行观察;qPCR检测罗格列酮灌胃组、生理盐水灌胃组瘤组织中LIMK1、uPA基因m RNA表达;应用Western blotting、免疫组织化学法(P-V法)检测各组移植瘤组织中LIMK1、uPA蛋白的表达。结果:一、罗格列酮对移植瘤的影响:(1)对移植瘤形态学的影响:灌生理盐水组与相对应的灌罗格列酮组的相比细胞异型性较大,细胞排列紊较乱,细胞间质多,细胞核染色深,核质比多。其中LIMK1过表达生理盐水灌胃组的异型性最明显,LIMK1沉默并用ROS灌胃组的异型性为最小。(2)qPCR检测罗格列酮对LIMK1、uPA基因mRNA表达的影响:罗格列酮灌胃组的肿瘤组织(2.4.6.8.10)中LIMK1、uPA基因mRNA的表达下降,与其相对应的生理盐水对照组(1.3.5.7.9)相比差异均具有统计学意义(P<0.05)。(3)Western blotting检测对肿瘤组织LIMK、uPA蛋白表达:罗格列酮灌胃组肿瘤组织中LIMK1、uPA蛋白与其相对应的生理盐水灌胃组相比表达下降,差异显著,有统计学意义(P<0.01)。(4)免疫组化检测移植瘤中LIMK1、uPA蛋白的阳性率:LIMK1、uPA阳性组织均呈现褐色,罗格列酮处理后的组织中LIMK1、uPA的阳性率(2.4.6.8.10)较相对应生理盐水灌胃组(1.3.5.7.9)的阳性率下降,差异均具有统计学意义(P<0.05)。二、各组移植瘤组织中LIMK表达与uPA表达的关系(为了避免罗格列酮对结果影响,我们选用生理盐水灌胃的实验组数据比较)。(1)q PCR检测各组移植瘤中,LIMK1基因mRNA表达:LIMK1基因mRNA表达,在LIMK1过表达组表达升高,而LIMK1沉默组表达下降,两者与普通MGC803组相比差异具有统计学意义(P<0.05),过表达空载体组及沉默空载体组与MGC803组相比无明显差异(P>0.05);uPA基因m RNA表达:在LIMK1过表达组表达升高,而在LIMK1沉默组表达下降,两者与普通MGC803组相比差异均具有统计学意义(P<0.05)过表达空载体组及沉默空载体组与MGC803组相比无明显差异(P>0.05)。各组移植瘤中LIMK1的mRNA相对表达量与uPA的mRNA相对表达量相关性分析得r=0.618,说明LIMK1与uPA表达呈正相关。(2)Western blotting检测移植瘤蛋白表达:LIMK1蛋白的表达:LIMK1高表达组LIMK1蛋白的表达较普通MGC803细胞组多,差异存在显著性有统计学意义(P<0.01),而LIMK1沉默组LIMK1蛋白的表达较普通MGC803细胞组少,差异具有统计学意义(P<0.01)。而过表达空载体组及沉默空载体组表达与普通MGC803组差别无明显统计学意义(P>0.05);uPA蛋白的表达:LIMK1高表达组uPA蛋白的表达较普通MGC803细胞组多,差异存在显著性有统计学意义(P<0.01),而LIMK1沉默组uPA蛋白的表达较普通MGC803细胞组少,差异具有统计学意义(P<0.01)。而过表达空载体组及沉默空载体组表达与普通MGC803组差别无明显统计学意义(P>0.05)。各LIMK1过表达组中LIMK1的阳性率与uPA的阳性率相关性分析得r=0.388,各LIMK1沉默组中LIMK1的阳性率与uPA的阳性率相关性分析得r=0.572。两结果均说明两蛋白阳性率呈正相关。(3)免疫组化检测移植瘤蛋白阳性率:LIMK1表达阳性率:LIMK1过表达组的阳性率较普通MGC803组高,有差异有统计学意义(P<0.05),LIMK沉默组阳性率较普通MGC803组细胞低,差异均具有统计学意义(P<0.05),而过表达空载体组及沉默空载体组表达与普通MGC803组差别无明显统计学意义(P>0.05)。uPA表达阳性率:LIMK1过表达组的阳性率较普通MGC803组高,有差异有统计学意义(P<0.05),LIMK1沉默组阳性率较普通MGC803组细胞低,差异均具有统计学意义(P<0.05),而过表达空载体组及沉默空载体组表达与普通MGC803组差别无明显统计学意义(P>0.05)。各组移植瘤中LIMK1的阳性率与uPA的阳性率相关性分析得r=0.783,说明两蛋白表达的阳性率呈正相关。结论:1、罗格列酮可以抑制MGC-803细胞裸鼠移植瘤的的生长。2、LIMK1可能是罗格列酮抑制人胃癌MGC-803细胞增殖、迁移及侵袭的作用靶点。3、胃癌中LIMK1与u PA关系密切并呈正相关关系。LIMK1高表达肿瘤的侵袭、迁移、增殖能力增强可能与其能诱导u PA的表达相关。