背景干扰素是机体细胞应对病毒及其他生物刺激分泌的一类小分子糖蛋白。其中,I型干扰素可通过激活胞内JAK-STAT通路启动众多ISGs的转录,如MX蛋白、IFIT蛋白等。但当ISGs过度激活时,可能导致机体出现免疫过度,甚至会导致自身免疫性疾病的发生。PIAS蛋白是一类能抑制活化的STATs转录活性的蛋白,从而参与ISGs的负调控过程。此外有研究发现,PIASy还可通过结合HDAC1及HDAC2降低目的基因启动子区域的组蛋白乙酰化修饰,从而抑制Smad和AR基因的转录活性。因此,本课题尝试寻找在ISGs的负调控作用中,PIASy可能互相作用的组蛋白修饰酶,并从表观遗传学角度研究PIASy抑制ISGs转录活性的分子机制。方法通过蛋白质免疫共沉淀技术(Co-IP)和质谱技术,寻找与PIASy相互作用的组蛋白修饰酶,并使用荧光定量PCR(RT-PCR)及染色质免疫共沉淀技术(Ch-IP)研究PIASy对ISGs基因转录及启动子区域组蛋白修饰的影响;通过分子克隆方法构建包含不同结构域的PIASy和RBP2重组质粒,并应用Co-IP技术寻找两者相互结合的结构域;构建稳定表达不同结构域PIASy的细胞,并通过RT-PCR和Ch-IP研究不同结构域对ISGs基因转录及启动子区域组蛋白修饰的影响。结果PIASy可与RBP2相互作用,且在PIASy+/+的MEF细胞中,其MX1、IFIT1启动子区域的组蛋白H3K4me3水平显著低于PIASy-/-细胞,从而抑制其转录活性,转录水平较低;PIASy主要通过其N端的1-218AA的区域与RBP2的JmjC结构域相互结合;与此一致的是,在稳定表达包含有PIASy蛋白1-218AA区域的PIASy-/-细胞中,其MX1启动子区域的组蛋白H3K4me3水平较PIASy-/-细胞明显下调,从而可抑制其转录活性。结论结果表明PIASy可通过其N端1-218AA的区域招募RBP2蛋白,下调ISGs(MX1、IFIT1)启动子区域的组蛋白H3K4me3水平,从而抑制ISGs的转录活性。