【摘 要】
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目的:探讨蛋白质精氨酸甲基转移酶2(protein arginine methyltransferase 2,PRMT2)高表达对甲状腺癌SW579细胞增殖的影响;并初步探讨其可能的分子机制。方法:1)本研究以甲状
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目的:探讨蛋白质精氨酸甲基转移酶2(protein arginine methyltransferase 2,PRMT2)高表达对甲状腺癌SW579细胞增殖的影响;并初步探讨其可能的分子机制。方法:1)本研究以甲状腺鳞癌细胞株SW579作为研究对象。利用慢病毒感染方法,将LV-PRMT2(4952-1)转染至SW579细胞,嘌呤霉素筛选PRMT2稳定高表达的细胞株,蛋白质免疫印迹实验(Western Blot)检测PRMT2-3Flag融合蛋白的表达验证转染是否成功,选取稳定高表达PRMT2基因的SW579细胞进行下一步研究。2)MTT法观察PRMT2高表达对SW579细胞增殖的影响;克隆形成实验检测PRMT2高表达对细胞克隆形成能力的影响;Western Blot检测PRMT2高表达后SW579细胞中细胞增殖相关因子p-AKT、p-GSK-3β、CCND1的蛋白表达水平;免疫共沉淀检测SW579细胞中甲状腺激素受体TRβ与PRMT2的相互作用。结果:1.转染LV-PRMT2(4952-1)至SW579细胞并通过嘌呤霉素筛选可获得稳定高表达PRMT2的细胞株。2.MTT检测及克隆形成实验结果显示PRMT2高表达可抑制SW579细胞的增殖。3.Western Blot检测结果显示PRMT2稳定高表达下调SW579细胞p-AKT、p-GSK-3β、CCND1蛋白的表达,而对TRβ的表达无明显影响。4.免疫共沉淀结果显示SW579细胞中TRβ与PRMT2存在相互作用。结论:1.PRMT2基因高表达可能通过调控Akt/GSK-3β/CCND1信号通路抑制SW579细胞的增殖。2.SW579细胞中TRβ与PRMT2存在相互作用。
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