南高丛越橘(Vaccinium australe)四倍体诱导及鉴定

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越橘属于杜鹃花科(Ericaceae)越橘属(Vaccinium),多年生落叶或常绿灌木,原产北美。果实为蓝色或红色,果实大小因种类不同而异,其果肉柔软多汁,风味醇美,含有丰富的维生素及其他果品中少有的特殊营养成分,具有较高的保健作用和药用价值,因此国际粮农组织将其列为人类五大健康食品之一。由于其独特的风味及营养保健价值,其果实及加工品供不应求。南高丛越橘原产美国东南部亚热带,分布在沿海及内陆沼泽地,耐湿热,耐寒冷,喜湿润、温暖的气候条件,适宜亚热带地区生长,其栽培品种较少。本试验选用的南高丛越橘“3#”为二倍体材料,引种重庆多年,适应性强,生长速度快,产量高,但果实较小。由于多倍体植株具有巨大性,本研究试图通过化学药剂诱变得到南高丛越橘“3#”的多倍体,为培育适应热带及亚热带的大果型越橘新品种奠定基础。本试验主要采用秋水仙素处理“3#”茎尖诱导四倍体,研究秋水仙素不同处理方式对其茎尖的诱导效果,并挑选处理浓度和时间的最佳组合。通过形态及细胞染色体数目检测对其进行倍性鉴定,获得了南高丛越橘“3#”四倍体植株。并对四倍体及二倍体的生物学特性、抗逆性及核型等进行分析比较,为越橘多倍体育种提供基础研究数据。主要研究结果如下:1.以秋水仙素处理后的南高丛越橘“3#”茎尖为外植体,筛选增殖培养基激素的研究结果表明:在改良的WPM培养基中添加0.15mg/L的ZT,作为增殖培养基效果较好,其增殖系数为3.5。2.在秋水仙素诱导四倍体植株的试验中,研究了秋水仙素的不同处理方法中最优处理方法及浓度与时间的最佳组合。从诱变效果看,浸渍法效果最佳,以0.1%的秋水仙素茎尖浸泡24h为最佳诱变组合,存活率为70%,变异率为13.33%,四倍体植株率为6.67%。3.植株经过秋水仙素处理后,通过形态和解剖学研究表明,变异植株表现为茎杆加粗,节间变短,叶片增厚,叶面积增大,叶色加深,叶形指数变小,保卫细胞增大,单位面积气孔数减少,栅栏组织和海绵组织厚度增加等特征。4.通过植株染色体计数表明,南高丛越橘“3#”四倍体染色体数目为2n=4x=48;二倍体染色体数目为2n=2x=24。变异植株中存在大量嵌合体,染色体数目处于24到48之间,并含极少数八倍体细胞。5.试验对四倍体南高丛越橘与二倍体南高丛越橘部分生理特征做出比较,结果显示:四倍体南高丛越橘“3#”叶绿素含量、SOD、POD、脯氨酸、可溶性糖均高于二倍体,丙二醛低于二倍体,差异极显著;四倍体叶片含水量略高于二倍体,差异不显著;四倍体电导率和电解质外渗率均显著低于二倍体。表明四倍体南高丛越橘“3#”较二倍体抗逆性增强,且加倍后在植株形态与生理特征方面都有较显著变化。6.通过四倍体和二倍体植株的核型分析比较,四倍体南高丛越橘染色体数目为48条,核型公式为:K(2n)=4x=48=40m+8sm,属于2B核型;二倍体南高丛越橘染色体数目为24条,核型公式为K(2n)=2x=24=18m+6sm,属于2B核型。表明南高丛越橘“3#”二倍体和四倍体的核型和染色体形态相似。
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