几株海洋微生物次生代谢产物筛选农用活性物质的研究

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据统计,目前从陆地微生物筛选到的活性物质中,有90%都是已知的(Doshida J,1996),这给新型活性物质的筛选工作造成较大困难。海洋微生物生活在高盐、高压、低温、低光照、寡营养等特殊的环境中,可以产生分子结构新颖独特、生物活性高的次生代谢物质,这在医药领域已经得到证实。由于海洋微生物在农业上的研究应用长期处于较低水平,因而通过海洋微生物代谢产物筛选杀虫活性物质还缺乏系统研究。本文以小菜蛾幼虫生物活性测试与斜纹夜蛾细胞系的细胞毒活性测试相结合的方法,系统地研究了几株具有生物活性的海洋微生物菌株的生物学特性、培养条件的优化、活性物质的提取和分离,以期为进一步开发利用这一生物资源和未来仿生合成提供线索和理论依据。主要研究结果如下:1.筛选出高活性菌株6株。小菜蛾幼虫生物活性测试初筛结果表明,供试285株不同地域、不同宿主的海洋微生物中,有16株具有较好杀虫活性,阳性率为5.614%。斜纹夜蛾细胞系细胞毒活性测试复筛结果表明,16株初筛活性菌株中,lv7-1,QJ-9, RSHF503,02AB8a,T31和BBY9-4等6株菌株具有较好的细胞毒活性,阳性率为2.105%。2. 16株初筛菌株中,从采样地点来看,采自北极、白令海和南极等高寒、寡营养等极端环境中的6株微生物的代谢产物表现出较高的杀虫活性,占16株活性菌株总数的37.50%;从宿主来源看,其中13株微生物菌株来自海泥、海沙等非生命体,3株来源于海藻、海绵、苔藓等生命有机体。3. QJ-9、T31和BBY9-4三株菌株的最佳培养条件如下:(1)QJ-9在培养时间120h,pH7,装液量200ml,碳源葡萄糖,氮源蛋白胨时的细胞毒活性最好;在培养时间84h,pH6,装液量为150ml,碳源为蔗糖,氮源为牛肉膏时其菌体生物量为最大;在培养时间108h,pH7,装液量200ml,碳源为蔗糖,氮源为牛肉膏时其次生代谢产物的产量为最大。(2)T31在培养时间168h,pH7.5,装液量150ml,碳源为蔗糖,氮源为KNO3时的细胞毒活性最好;在培养时间84h,pH6.5,装液量150ml,碳源为蔗糖,氮源为牛肉膏时其菌体生物量为最大;在培养时间168h,
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