目的: 研究黑龙江地区临床分离的铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的机制。 方法: 利用常规纸片扩散法药敏实验从我院临床分离的174株铜绿假单胞菌中筛选出对亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌42株及敏感株20株,以EDTA、2-MPA为金属酶抑制剂,头孢他啶(CAZ)和亚胺培南(IMP)为底物,在M-H平板上进行双纸片协同实验,筛选金属β-内酰胺酶阳性菌株；采用超声破碎方法提取细菌外膜蛋白,应用BCA法测定蛋白含量,进行SDS-PAGE电泳,利用水杨酸盐抑制试验确定外膜蛋白D2在SDS-PAGE凝胶上的位置,通过凝胶分析软件分析外膜蛋白D2的相对含量,并与敏感组对比,进行统计学分析,研究铜绿假单胞菌外膜蛋白D2相对含量改变与亚胺培南耐药之间关系；选取20株外膜蛋白D2表达减少或缺失株,根据外膜蛋白D2的编码基因设计引物,采用PCR法检测各菌株的外膜蛋白D2基因,研究外膜蛋白D2基因改变与亚胺培南耐药之间的关系。 结果: 在42株耐药菌株中,金属β-内酰胺酶检测阳性的菌株有20株,其中EDTA与CAZ及IMP协同阳性的有11株,2-MPA、EDTA与CAZ及IMP均协同阳性的有9株；另外,外膜蛋白D2完全缺失的有11株,减少的有18株,与敏感组相比外膜蛋白D2的相对含量明显降低；在20株外膜蛋白相对含量减少或缺失株中,同时扩增出546bp和109bp两个片段有2株,仅扩增出546bp大片段的有4株,仅扩增出109bp小片段的有2株,未扩增出现任何片段的有12株。 结论: 黑龙江地区铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的机制主要为金属β-内酰胺酶的产生及外膜蛋白D2的减少或缺失,并可同时并存,但不排除还有其他机制存在。