60Co-γ射线对两种露地菊品种辐射诱变效应的研究

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露地栽培菊(Dendranthema×grandiflora Ground-grow Chrysanthemum)因其植株低矮,开花繁密,耐粗放管理,兼具社会、经济、环境效益等优势而备受关注。近年来许多露地菊品种由于栽培管理不当,出现了植株变高、分枝多等品种退化现象。因此,改良培育具有矮化特性的露地菊品种具有重要意义。本文以露地菊品种’东林瑞雪’、’粉翎’为试验材料,通过60Co-γ射线照射处理后,从植株的形态性状、生理生化指标上探究不同辐射剂量对植株的诱变效应;再在细胞学水平上,观察变异植株减数分裂异常行为,初步探究射线辐射露地菊品种的细胞学效应;最后通过ISSR分子标记技术从分子水平上鉴定性状发生变异的植株,对遗传变异程度进行分析,以期为露地菊辐射诱变育种提供理论支持。研究结果表明:1.’东林瑞雪’半致死剂量在35Gy左右,而’粉翎’在35Gy剂量下的死亡率仅为24.44%。说明’粉翎’对辐射的耐受能力强于’东林瑞雪’。辐射对’东林瑞雪’的株高有一定的抑制作用,且剂量越高,抑制作用越显著;而辐射对’粉翎’株高的影响呈现出先增加后降低的趋势。2.γ射线辐照后,两种露地菊叶部形态、花部形态、花瓣数、花期均发生一定的变化。表现为单株叶片数变少、叶片长度、宽度变小、叶柄长度变短等现象;同时出现叶裂增大、叶片失绿、叶片不对称轮生、革质性叶、叶片反卷、披针形叶等叶型变异,且两品种的叶型变异率随辐射剂量的增加而增大。花部变异表现为花径增大、花梗长度减小。两个品种的舌状花数量随着辐射剂量增加呈现先增加后减少的趋势,管状花的数量变化不明显;同时辐射对露地菊花期也有影响,但因品种不同,作用效果也不一致。辐射对白色花品种’东林瑞雪’花部形态的影响主要表现在花型上,而粉色系品种’粉翎’花部变异主要表现在花色上。3.γ射线辐照后,两种露地菊各项生理指标变化幅度较大。叶片叶绿素含量出现了下降的趋势,在25Gy剂量下,’东林瑞雪’叶绿素含量下降显著,而’粉翎’叶绿素含量呈现出一定的上升趋势;可溶性蛋白的含量随辐射剂量升高而不断下降;丙二醛含量与脯氨酸含量呈显著上升趋势,但’东林瑞雪’的上升幅度明显较’粉翎’大;SOD活性呈现先上升后下降的趋势;POD活性随辐射剂量增加呈现出上升的趋势;’东林瑞雪’ CAT活性整体呈现先升高后下降的趋势,而’粉翎’ CAT活性表现为上升的趋势,表明生理指标的变化与辐射的敏感性有一定相关性,’东林瑞雪’对辐射的敏感性较强,因此辐射后各项生理指标的变化幅度也较大。4.γ射线辐照后,两种露地菊品种出现一系列的染色体畸变,且随着辐射剂量的增加,染色体畸变率也随之增大。’东林瑞雪’染色体变异类型包括染色体粘连、单价体、单极性、落后染色体、染色体桥、微核等异常现象。在’粉翎’的处理组中又发现染色体分裂的不同步、膜外核等异常现象。5.两种露地菊品种变异植株的ISSR分析。在’东林瑞雪’品种共计扩增出72条条带,其中64条(88.89%)表现为多态性,遗传相似系数在0.177-1.000之间,总平均值为0.394;’粉翎’品种中共计扩增出110个条带,多态性条带为93条(84.54%),遗传相似性系数在0.337-1.000之间,总平均值为0.552。通过ISSR聚类分析的结果可知,两种露地菊品种的聚类结果与表观性状有关,而与辐射剂量的关系不明显,说明辐射诱变的不定向性,即使在同一辐射的剂量下也不能诱导变异向同一方向发生变化。因此,可以认为γ射线对于露地菊品种来说是一种有效的诱导方法,并且通过ISSR分子标记技术能成功鉴定出突变体。
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