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为了提高肉鸡的成活率,减少疾病的发生,抗生素被广泛使用。肉及肉食产品中抗生素的残留成为重要的食品安全隐患。为了减少肉鸡养殖环节抗生素的使用,提高鸡肉的品质与加工特性,寻找有效的饲用微生物制剂及植物天然产物来改善肉鸡的生长性能与肉质成为行业关注的热点。本试验在探讨了茶多酚(Tea Polyphenols,TP)对模式大鼠肠道内微生物的构成及TLRs的影响基础上,选择分离自牛奶的L.brevis M8菌株进行配伍灌喂黄羽鸡,研究其对黄羽鸡生长性能、肉品质、细胞因子以及钙蛋白酶系表达等的影响,得到如下主要研究结果:1、TP对大鼠肠道微生物及结肠TLRs表达的影响对照组和TP组灌喂大鼠后,其体内乳杆菌属细菌所占的比例随灌喂时间的增加而减少。经TP组灌喂6W后,肠道微生物菌群构成发生了显著性差异;TP组灌喂大鼠肠道内拟杆菌属(Bacteroides)、梭状芽孢杆菌属(Clostridium)、葡萄球菌属(Staphylococcus)的细胞数目显著降低(p<0.05),说明TP能够调整肠道微生物菌群的构成。同时,TP组大鼠的结肠组织中Tlr4基因的表达未发生变化,而Tlr2和Tlr7则表现出下调趋势(p<0.01);Tlr9表达量约降低至对照组的1/5(p<0.05);故TP灌喂组大鼠Tlrs的下降可能与Lactobacillus、Bacteroides、Bifidobacterium细菌数目的下降存在一定联系。TP组灌喂6W后,小肠、结肠中IgA浓度显著低于对照组(p<0.05),前者与Clostridium和Staphylococcus细胞数目减少存在相关性(p<0.05),后者与肠道菌群中Bacteroides、Bifidobacterium、Streptococcus及Clostridium细胞数目下降存在显著相关性(p<0.01)。结果表明TP能够通过调整肠道微生物菌群的构成,进而调整机体的免疫反应。2、L.brevis M8相关益生性特征的研究体外试验结果发现M8菌株对肠道致病菌Escherichia coli O157:H7和S.typhimurium CICC 21482的抑制率分别达99.73%和99.54%,表明M8菌株在机体内可能具有抑制有害菌生长,减少腹泻发生作用,能间接降低抗生素使用,提高鸡肉的安全性。另外,灌喂了M8菌悬液的8w龄黄羽鸡腺胃(p<0.01)、肌胃(p<0.05)、小肠(p<0.01)、胰腺(p<0.05)的蛋白酶活性均显著提高,说明M8菌株有助于促进机体的消化能力。检测发现血清中溶菌酶活性提高了9.28%(p<0.05),总蛋白含量提高了11.43%(p<0.05),白蛋白含量提高了14.69%(p<0.05),提示M8菌株具有提高黄羽鸡非特异性免疫功能的作用。3、TP与M8菌株配伍对黄羽鸡生长性能的影响为研究TP与M8菌株配伍对黄羽鸡生长性能的影响,试验选用1日龄黄羽鸡240羽,随机分成8组,每组3个重复,每个重复10羽,对照组及试验组每日分别定时灌喂无菌水及中剂量M8菌液、中剂量TP液、低剂量M8菌液+中剂量TP液、中剂量M8菌液+中剂量TP液、高剂量M8菌液+中剂量TP液、低剂量TP液+中剂量M8菌液、高剂量TP液+中剂量M8菌液,为期56日。实验结果表明:较对照组,7个试验组灌喂对28~56日龄黄羽鸡的体重、体重增加指标具有不同程度的减缓作用;而在42~49日龄时,中剂量TP、M8单独或配伍灌喂黄羽鸡,其料重比上升,直接表现为降低黄羽鸡体重,推测其可能间接降低试鸡腹脂率,故二者可能对调控黄羽鸡胴体及肉质有利。4、TP与M8菌株配伍对黄羽鸡肉质的影响分别对8个试验组56日龄肉鸡进行宰杀,采集鸡胸肌样品检测各项肉品质指标,结果表明:1)低、中剂量TP+中剂量M8菌液显著提高了试鸡肌肉色泽(p<0.05);屠宰24 h内,各试验组试鸡肌肉pH值均维持在6.31~6.74范围内(p>0.05),可有效避免PSE肉的形成;另外,M8菌液、TP单独或二者配伍灌喂均能降低试鸡肌肉的滴水损失,并显著提高其CAPNs的表达量(p<0.05),且TP液的剂量与CAPNs表达量呈正相关。2)M8菌液、TP液灌喂后试鸡肌肉EAA含量为40%~41%,EEAA/NEAA为0.70~0.71间,完全符合FAO/WHO的推荐下限标准40%和0.6;二者配伍灌喂较TP液、M8菌液单独灌喂能分别提高TAA、EAA(p<0.05含量)。因此,TP与M8配伍对提升黄羽鸡肉加工特性和营养价值有积极作用。5、TP与M8菌株配伍对黄羽鸡免疫机能及血清生化指标的影响分别对8个试验组56日龄肉鸡进行宰杀,采集血液、免疫器官等样品检测各项生化或免疫指标,结果表明:1)灌喂TP、M8对黄羽鸡免疫器官指数有显著提高效果(p<0.05),二者配伍组优于单独灌喂组,其中,中剂量M8配伍中剂量TP组灌喂分别提高脾脏指数、法氏囊指数23.24%、19.59%(p<0.05);而中、高剂量M8配伍低剂量TP、或中剂量M8配伍高剂量TP对黄羽鸡胸腺指数亦有提高。可推测L.brevis M8与TP间可能存在某种互作增效机制。2)灌喂TP、L.brevis M8对黄羽鸡细胞因子水平的影响存在显著差异(p<0.05),对IL-1、IL-4、TNF-α、IFN-γ细胞因子水平均有明显提高(p<0.05),对IL1-β细胞因子水平降低作用显著(p<0.05),这与第2章试验中的结果单独灌喂TP能影响机体免疫调节能力相符合;配伍组灌喂效果优于单独组,其中,中剂量M8配伍TP组灌喂黄羽鸡6W效果最佳,这可能与L.brevis M8菌株对黄羽鸡肠道中微生物菌群的调整,及其所分泌的Slps作为抗原物质对肠道上皮细胞识别结合有关。3)对黄羽鸡血清胆固醇的影响:L.brevis M8、TP灌喂的黄羽鸡血清中的LDL、TG、CHO含量显著降低(p<0.05),其中,中剂量M8配伍TP灌喂降低LDL的作用最大;低、中剂量M8配伍低剂量TP及中剂量M8配伍低剂量TP组降CHO作用最大(p<0.05);中剂量M8配伍中剂量TP灌喂降TG作用最大(p<0.05);因此,中剂量TP配伍M8灌喂黄羽鸡,能显著降低血清胆固醇含量。