目的 1．研制出一种体积小、携带方便、使用简单、非医务工作者也会使用的气雾剂型伤口急救保护剂，用于伤口火线抢救(战时)或院前急救(平时)。伤后即可喷洒到伤口，起到迅速止血、抑菌等作用，尽可能少用甚至不用止血带、急救包和无菌敷料包扎，以实现受伤现场自救互救，预防伤口失血过多引起休克，挽救生命，保全肢体，降低感染发生率。 2．伤口急救保护剂对各种渗血创面、伴肢体大动脉出血伤口能迅速、有效止血。 3．伤口急救保护剂对伤口常见的革兰氏阳性或阴性菌、厌氧菌以及真菌等具有抑菌作用。 4．伤口急救保护剂能够通过生物学评价证实安全可靠。 方法 1．根据伤口急救保护剂使用目的制订研制标准并选择各个组成成分，再经过化学试验确定最终配方。 2．采用切割伤法建立猪臀部凹陷性创面、侧面创面、膝关节处创面等三种模型共33个。伤后向每个创面喷洒伤口急救保护剂5-10s，在12h内观察动脉压、心率、止血时间、保护剂膜形成时间、保护剂膜厚度以及保护剂膜是否破裂而继发出血。分别在伤后即刻、0.5h、1h、2h、3h、4h、6h、8h、12h取创面软组织及保护剂膜进行组织学、电镜检查。 3．采用创伤法造成60头猪共60条股动脉部分破裂，按照保护剂止血前是否擦拭伤口以及是否辅助止血带、指压法止血，分别建立擦拭或不擦拭伤口的止血带法模型、指压法模型和直接喷保护剂法模型等6种止血模型，每种模型均制作10个。术后12h内观察动脉压、心率、止血时间、保护剂膜形成时间、保护剂膜厚度以及保护剂膜是否破裂而继发出血，计算每种模型的止血成功率。 4.进行伤口急救保护剂对污染伤口的抑菌试验，在6头家猪背部脊柱两侧做13个直径2.scm的圆形伤口，深达肌层。每个伤口分别涂抹3x 10‘CFU/ml金黄色葡萄球菌(ATCC25923)菌液100林1。15分钟后1个伤口作对照直接取材做细菌计数，6个伤口喷洒保护剂，其余伤口以无菌纱布包扎，lh、4h、sh、12h、18h、24h内在保护剂和纱布组分别选1个伤口取材观察渗出情况，采用平板菌落计数法计算每克伤口组织的细菌数，观察保护剂抑菌效果。 5.进行伤口急救保护剂体外抑菌试验，分别将金黄色葡萄球菌 (ATCC25923)、柠檬色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌(ATCC32204)、表皮葡萄球菌(ATCC26101)、大肠埃希氏杆菌(ATCC25922)、产气荚膜杆菌(ATCC64701)、普通变形杆菌、铜绿假单抱菌(ATCC27853)、无毒炭疽杆菌、无毒鼠疫杆菌、脆弱类杆菌、白色念珠菌等病原微生物复活，并接种到培养基中。将直径6llun的灭菌滤纸片放置于培养皿中央，分别按10 pl的剂量滴入保护剂，在37℃下孵育24h后取出测量抑菌直径，观察保护剂抑菌效果。 6.伤口急救保护剂生物学评价:按照国家医疗器械生物学评价要求，分别进行:(l)溶血试验。将保护剂喷洒到盛有生理盐水的培养皿中，待保护剂固体薄膜成形后，将其干燥，制成三块相同面积的保护剂膜并放入试管中，按一定比例加入一定量的生理盐水作为试验组，连同加入生理盐水的阴性对照组和加入了蒸馏水的阳性对照组一起经37士0.5℃水浴、加入新鲜且稀释的兔血、再水浴、离心等操作，自每管取上清液在分光光度计上测量各自的0D值:(2)细胞毒性试验。将保护剂喷洒到盛有无菌生理盐水的培养皿中，待保护剂固体薄膜成形后，测量并计算保护剂膜厚度、表面积，按检测标准要求加入一定量的无菌生理盐水制成保护剂浸提液，放入37士0.5℃培养箱浸提24h。采用间接接触试验的琼脂覆盖法制备阴性对照、阳性对照以及培养基、小鼠L929细胞、琼脂培养基平板，用中性红活性染液染色，放置样品，在37士0.5℃的C02培养箱中培养24h，取出观察样品周围及样品下面脱色区范围，计算R值;(3)急性全身毒性试验。将保护剂喷洒到盛有生理盐水的培养皿中，待其固化成膜后，计算其表面积并加入一定量生理盐水，制成保护剂浸提液浸提24h。雌、雄小鼠各10只随机分为对照组和试验组，每组10只，雌雄各半，试验前称重并记录。按照lml/209的剂量在对照组每只小鼠尾静脉注射生理盐水，试验组注射样品浸提液。注射后24h、48h、72h观察小鼠各种反应;(4)皮肤刺激试验。试验前24h在6只兔的背部皮肤备皮，分别采用两种方法制作保护剂试验样品并进行动物试验:一是将保护剂喷洒到盛有生理盐水注射液的培养皿中，制成保护剂浸提液浸提24h，试验时直接将浸提液浸透无菌干燥的纱布块中;二是将保护剂喷洒到无菌干燥的纱布块中，再进行贴敷试验。6h后去除敷料，在1h、24h、48h、72h内观察接触部位反应情况，判定其结果并记分;(5)致敏试验。将保护剂喷洒到盛有生理盐水的培养皿中，待固化成膜后，制成浸提液作为试验样品。30只豚鼠随机分为阴性对照组(生理盐水)、阳性对照组(5%甲醛溶液)和试验组，每组10只。每只动物经皮内诱导、局部诱导、激发等程序，观察试验组和对照组激发部位皮肤反应程度并进行评分。结果.伤口急救保护剂的配方包括主体成分Q一氰基丙烯酸酷系列粘合剂(50一70份)、增强剂(2 .5一6.5份)、增韧剂(0 .5一2.5份)以及环保型抛射剂(15?