花生红衣中多酚的提取及体外抗氧化研究

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花生红衣是豆科植物花生的种皮,它能抑制纤维蛋白的溶解,增加血小板的含量,改善血小板的质量,改善凝血因子的缺陷,加强毛细血管的收缩机能,促进骨髓造血机能。所以对各种出血及出血引起的贫血、再生障碍性贫血等疾病有明显效果。本论文采用东北地区特产“四粒红”花生红衣进行试验,对花生红衣中活性成分进行了系统的分析,并对其所含的多酚进行了提取、分离、纯化及体外抗氧化试验,为其将来应用到功能食品中奠定了理论基础。(1)定性分析花生红衣中活性成分通过物理方法和化学方法对花生红衣中所含的活性成分进行了定性分析,确定花生红衣中含有多酚类物质、生物碱、糖及苷类、皂苷、甾体及萜类、黄酮类化合物、蒽醌类化合物、油脂、内酯、香豆素及其苷和有机酸等多种活性成分。(2)花生红衣多酚的提取研究首先确定了提取花生红衣多酚的提取溶剂;对溶剂提取法、微波辅助提取法、超声波辅助提取法三种提取方法进行比较;选择提取效果最好的一种方法,对此方法的主要因素进行单因素试验,进一步用响应面优化分析软件进行分析处理,确定了花生红衣多酚的最佳提取工艺参数。最佳提取工艺参数为:乙醇浓度60%,液料比24:1(mL/g),超声时间21min,超声功率162W,在此条件下花生红衣多酚的得率为15.05%。采用此方法提取花生红衣多酚比传统的溶剂提取法的得率提高了5.07%。(3)花生红衣中多酚的分离、纯化及分离组分分析花生红衣多酚的粗提液用醇沉法去除多糖、蛋白质等大分子物质后,用乙酸乙酯萃取,后用AB-8大孔吸附树脂进行分离,用响应面软件优化动态吸附条件,得到最佳动态吸附条件为:流速1.5mL/min、pH值为4.0、稀释倍数为3倍。对动态解吸条件进行单因素试验,得到最佳洗脱条件为:流速1.5mL/min, pH值为5。再采用薄层层析纯化分离组分,接着对分离纯化组分进行光谱分析,通过紫外-可见光谱、红外光谱分析可基本确定其为多酚类物质。通过与对照品的高效液相色谱对比,最终可以确定分离组分1含有(+)-儿茶素,组分2含有白藜芦醇。(4)对花生红衣多酚粗品及分离组分进行体外抗氧化研究本试验采用总抗氧化能力(T-AOC)测定、邻苯三酚自氧化法测定、清除羟自由基(OH)能力测定等试验研究花生红衣多酚粗提物及其分离纯化组分的体外抗氧化能力,以不同浓度的抗坏血酸为阳性对照,测试结果表明含白藜芦醇的组分抗氧化能力最强,含(+)-儿茶素组分次之,多酚粗提物的抗氧化能力也比较强。说明花生红衣多酚粗提物及其分离组分可以作为一种良好的天然抗氧化剂应用到功能食品中。
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