论文部分内容阅读
本试验以健康的红笛鲷为实验动物,研究在其基础饲料中添加不同剂量的中草药免疫增强剂对其免疫功能、生长性能和抗病力及主要肠道菌群的影响,确定中草药免疫增强剂在红笛鲷中的添加剂量,以初步探讨对其作用机理。选用健康均匀的红笛鲷(体重234.95±19.26g,体长24.76±1.42cm)随机分为5组,按科学饲养方法的饲养管理。对照组饲喂基础饲料,0.5组、1.0组、1.5组和2.0组为实验组分别饲喂添加0.5%,1%,1.5%和2%中草药免疫增强剂的饲料,试验饲喂期为56天。中草药免疫增强剂由黄芪、当归、甘草和山植等6种中草药按一定比例配比制备成。在饲喂后的第1天、第14天、第28天、第42天、第56天,采样及测定红笛鲷的相对增重率和免疫指标如碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶活力(SOD)、过氧化物酶活力(POD)、酚氧化酶活力(PO)、溶菌酶含量(LZM)、抗菌活力、红细胞及白细胞数、白细胞吞噬活力、NBT阳性细胞数和免疫器官指数,同时也测定肠道罩细菌总数、弧菌属数和大肠杆菌数量。在饲喂56天后,计算各实验组红笛鲷的成活率及注射溶藻弧菌后以测定其对溶藻弧菌的免疫保护力。结果表明,基础饲料中添加中草药免疫增强剂可以增强红笛鲷的免疫功能。在饲喂第28天、第42天和第56天,饲喂不同剂量的中草药免疫增强剂可以促红笛鲷免疫器官和血细胞的增殖,其免疫器官脾指数、头肾指数、白细胞及红细胞数量均高于同期对照组(P>0.05)。而其白细胞吞噬百分率、NBT阳性细胞数量、POD活力均显著高于同期对照组(P<0.05),同时LZM活力和抗菌活力则极显著高于同期的对照组(P<0.01)。在各个实验组中,尤其以添加了1.5%中草药免疫增强剂的实验组的效果为最好。对红笛鲷SOD活力方面的影响,在第28天后,中草药免疫增强剂可以显著提高红笛鲷血清的SOD活力。其中1.0组、2.0组和1.5组在第28天时达到峰值,分别为31.44 U/ml、30.50 U/ml和29.28 U/ml,分别是同期对照组的1.53倍、1.48倍和1.41倍,差异性极显著(P<0.01)。中草药免疫增强剂也可提高各个实验组红笛鲷血清中的AKP活力,但除了添加量1.5%中草药免疫增强剂的1.5组在第42d和56d红笛鲷血清的AKP平均水平显著高于同期对照组的(P<0.05),对其他实验组的影响却不显著(P>0.05)。中草药免疫增强剂对红笛鲷有很好的促生长及提高养殖成活率和抗病力的效果。饲喂中草药免疫增强剂的实验组红笛鲷的相对增重率都高于同期对照组的,并从饲喂28天后开始,实验组红笛鲷的相对增重率都显著高于同期对照组(P<0.05)。根据相对增重率的数据分析结果,饲喂56天期间效果最好的是1.5组和1.0组,增重率分别为65.4%和63.3%显著高于对照组的46.7%(P<0.05)。在饲喂养殖结束后计算各实验组的成活率表明,添加中草药免疫增强剂实验组的成活率均高于对照组的88.03%,其中以1.5组的成活率最高为92.25%,2.0组的次之为90.84%。同时,通过人工注射溶菌弧菌测定各实验组对溶菌弧菌的免疫保护力结果表明,饲料中添加中草药免疫增强剂可提高红笛鲷对致病菌溶藻弧菌的免疫保护力,其中以2.0组的免疫保护力最高达到70.4%,1.5组的次之为45.5%。因此,在饲料中添加1.5%-2.0%的本中草药免疫增强剂对促进红笛鲷的生长,提高其养殖成活率及其对溶藻弧菌的免疫保护力的效果比较好。在饲料中添加本中草药免疫增强剂同样也会对红笛鲷后肠道菌群产生影响,肠道里细菌总数、大肠杆菌和弧菌属数量都有变化。除了0.5组在饲喂第56天红笛鲷的肠道细菌总数量略低于对照组,大肠杆菌的数量略高于对照组,而1.0组、1.5组和2.0组在饲喂56天期间,红笛鲷肠道细菌总数量显著增加(P<0.05),同时肠道里弧菌属和大肠杆菌受到抑制,数量显著低于同期对照组的(P<0.05)。在四个中草药免疫增强剂添加剂量中,以添加2.0%中草药免疫增强剂连续饲喂56天抑制肠道致病菌如大肠杆菌和弧菌属的效果为最好,添加1.5%中草药免疫增强剂的实验组效果次之。结论:基础饲料中添加适度剂量的本中草药免疫增强剂能显著提高红笛鲷的免疫力和养殖成活率,促进其生长,增强其抗病能力及抑制肠道里致病菌的生长从而改善红笛鲷肠道里菌群环境。经过中草药免疫增强剂对红笛鲷的免疫功能、生长、成活率、抗病及肠道菌群的影响结果综合分析,确定本中草药免疫增强剂在海水鱼基础饲料中的最佳添加剂量为1.5%(W/W)。