紫红獐牙菜活性成分研究

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紫红猜牙菜(Swertia punicea Hemsl.vair.punicea)是龙胆科(Gentianaceae)獐牙菜属(swertia)一年生草本植物。分布于云南、四川、贵州、湖北西部、湖南。一般生长在山坡草地、河滩、林下、灌丛中,海拔400-3800米。其性苦寒,具有清肝利胆,除湿清热之功效。主要用于治疗黄疸,胆囊炎。本论文利用大孔吸附树脂、硅胶、聚酰胺等色谱分离技术以及结晶方法对紫红獐牙菜全草的(口山)酮类成分进行了较为系统的分离,应用NMR、质谱等波谱学方法进行结构鉴定,结果从紫红獐牙菜中共分离出14个化合物,其中鉴定出了 8个(口山)酮类成分,分别为:8-0-β-D-吡喃葡萄糖基-1,5-二羟基-3-甲氧基(口山)酮(1)、Tetrahydrosertianolin(2)、1,3,7,8-四羟基(口山)酮(3)、1,3,8-三羟基-5-甲氧基(口山)酮(4)、1,5,8-三羟基-3-甲氧基(口山)酮(5)、1,7-二羟基-3,4,8-三甲氧基(口山)酮(6)、2-O-D-吡喃葡萄糖基-1,3,6,7-四羟基(口山)酮(7)、3-0-demethylswertipunicoside(8)。以常用抗氧化剂Vc和BHT为阳性对照,通过DPPH ·法测定紫红獐牙菜中得到的(口山)酮单体成分清除DPPH ·的能力,并计算各单体IC50。7个单体化合物的清除能力与浓度呈量效关系;由IC50得出1,3,7,8-四羟基(口山)酮、1,5,8-三羟基-3-甲氧基(口山)酮、2-O-D-吡喃葡萄糖基-1,3,6,7-四羟基(口山)酮对DPPH自由基清除能力强于Vc;其他单体的抗氧化能力都低于Vc和BHT。采用HPLC法测定了紫红獐牙菜药材中5种(口山)酮类成分的含量,方法为:色谱柱为Alltimal C18柱(250mm×4.6mm,5 μm),甲醇-0.06%磷酸水溶液作流动相梯度洗脱,0 min:甲醇20%,50 min:甲醇80%,55 min:甲醇100%;流速为1.0mL.min-1,检测波长254nm,柱温30 ℃。这5种(口山)酮类成分分别在14~140 μ g · mL-1、6~60 μg·mL-1、4~40 μ g · mL-1、5~50 μ g · mL-1、9~90 μg ·mL-1内线性关系良好,相关系数分别为0.9996,0.9995,0.9997,0.9999,0.9996;平均回收率分别为 99.72%,99.21%,98.92%,99.32%,98.80%,RSD均小于2%(n=5)。8-0-β-D-吡喃葡萄糖基-1,5-二羟基-3-甲氧基(口山)酮在紫红獐牙菜全草中含量最高。
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